产品名称：冻干补体
产品货号：XFD543
产品规格：0.5ml*10支
储存条件：4℃冷藏
有效期：2年
供溶血试验用的冷冻干燥的豚鼠血清。豚鼠血清含有溶解性补体,可直接当作补体使用。补体在常温下保存容易失效,但冻干保存时,2年内效力不下降。冻干方法是:将一批豚鼠的新鲜血清混匀后,定量分装于安瓿中,冷冻干燥后真空封口。
使用方法：每支加0.5ml蒸馏水复溶，静置10分钟后轻轻摇匀；滴定时用缓冲生理盐水或缓冲液(不能含NaN3)做1:5-10倍稀释使用，临用现配。
稳定性：4-8℃保存1年(暗处保存)
用途：总补体溶血活性(CH50)检测使用
注意事项：请穿戴实验服及一次性手套操作。
血清总补体溶血活性(CH50)测定方法一、原理利用绵羊细胞与相应抗体(溶血素)结合成的复合物，可激活血清中的补体，导致红细胞溶解，当红细胞和溶血素量一定时，在规定反应的时间内，溶血程度与补体量及活性呈正相关。在接近50%溶血(CH50)时，二者之间近似直线关系，故以50%溶血作为敏感的判断终点。以引起50%溶血所需的小补体量为一个CH50U，可计算出待测血清中总的补体溶血活性，以CH50U/ml表示。
本实验主要反映补体经典活化途径的溶血功能，其结果与补体C1～C9各组成分的量及活性均有关。
二、试剂及配制
1.缓冲生理盐水：
(1)贮存液：Na2HPO4.12H2O2.85gKH2PO40.27gNaCl17.00g蒸馏水定容至100ml4℃保存备用(2)应用液：5ml贮存液加95ml蒸馏水，再加10%硫酸镁0.1ml，当日配制，12小时内使用。
2.2%绵羊红细胞：无菌采取绵羊血液，于等量Alsever液中可保存3周。用前以缓冲液洗3次，并配成2%细胞悬液。必要时可用吸光光度法或细胞计数法使悬液细胞浓度标准化。
3.溶血素：将绵羊红细胞溶血素(效价1:4000)，用应用液做1:2000倍稀释(即1ml溶血素加1999ml应用液)。4.待测血清：新鲜血液室温放置30min，再4℃放置60min，使血收缩，4℃离心(3000r/min)10min，取上清，-20℃保存。
三、操作步骤试管法(改良Mayer法)1.致敏羊红细胞：2%绵羊红细胞加等量稀释后的溶血素(1:2000)，混匀，置37℃水浴30min。
2.稀释血清：待测血清0.2ml，加应用液3.8ml，稀释度为1:20。
3.配制溶血标准管：全溶血管:2%绵羊红细胞2ml加8ml蒸馏水，混匀。50%溶血管:取全溶血管液2ml加缓冲液2ml。
4.按表所示，依次加各成分于试管中，混匀，置37℃水浴30min，第10管为非溶血对照：补体CH50测定试管法
5.结果测定：取出试管，2000r/min离心10min，对照管应不溶血。肉眼比色，选与50%溶血标准管相近二管，再用分光光度计测(波长542nm、0.5cm比色杯)OD值，确定与标准管接近者为终点管，然后按下公式计算CH50值：血清补体CH50(U/ml)=(1/血清用量)×稀释度。如第5管为终点管，测待测血清中CH50为66.7U/ml。血清补体CH50正常值为50-100U/ml。
红细胞、补体溶血实验系列(目录)绵羊红细胞(SRBC)鸡红细胞豚鼠红细胞兔红细胞牛红细胞猪红细胞猫红细胞犬红细胞人红细胞溶血素(绵羊红细胞溶血素：SRBC抗体)补体(冻干豚鼠血清)(可订做各种浓度，请与销售联系)我公司
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血清，指血液凝固后，在血浆中除去纤维蛋白分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白已被除去的血浆。其主要作用是提供基本营养物质、提供激素和各种生长因子、提供结合蛋白、提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤、对培养中的细胞起到某些保护作用。
血清的保存应该注意以下几点：
（1）需要长期保存的血清必须储存于-20℃-70℃低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月，由于血清结冰时体积会增加约10%，因此，血清在冻入低温冰箱前，必须预留一定体积空间，否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。
（2）热灭活是指56℃，30分钟加热已完全解冻的血清。加热过程中须规则摇晃均匀，此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement)灭活，除非必须，一般不建议作此热处理，因为热处理会造成血清沉淀物显著增多，而且还会影响血清的质量，补体参与反应有：细胞毒作用，平滑肌细胞收缩，肥大细胞和血小板释放组胺，增强吞噬作用，促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化。
（3）瓶装血清解冻需采用逐步解冻法：-20℃至-70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室温，待全部溶解后再分装。在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀（小心勿造成气泡），使温度与成分均一，减少沉淀的发生。切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻，这样因温度改变太大，容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。
（4）血清中的沉淀物、絮状物：主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成，这些絮状物不会影响血清本身的质量，可用离心3000rpm，5分钟去除，也可不用处理，显微镜下"小黑点"。经过热处理过的血清，沉淀物的形成会显著增多。有些沉淀物在显微镜下观察象"小黑点"，常误认为血清受污染，一般情况下，此小黑点不会影响细胞生长，但如果怀疑血清质量，则应立即停止使用，更换另一批号的血清。
