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Western Blot(免疫
企业认证
佰欧晶医学
Western Blot(免疫印迹)
每张膜(整张)
A:电泳分离蛋白质,由裂解细胞或组织制备目的蛋白质样品,经SDS-PAGE电泳处理后,不同分子质量大小的蛋白质得到分离。
B:转膜,将电泳分离的条带从凝胶转移至NC/PVDF膜上。常用的方法是电洗脱或电泳转移,形成“负极-海绵-三层滤纸-胶-膜-三层滤纸-海绵-正极”转膜结构,在施加电场后蛋白质从凝胶中移出并吸附在膜表面。
C:抗体孵育,用目标蛋白的抗体(一抗)处理膜,漂洗除去未结合的抗体,膜上仅含有目标蛋白结合的一抗。再用标记的二抗进行酶免疫定位。
D:显影分析,用x-ray底片曝光,根据信号的强弱调整曝光时间或不同时间多次压片以达到最佳效果。曝光完成后取出x-光片迅速浸入显影液中显影,待条带明显后停止显影,分析结果。
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83 人阅读发布时间:2022-11-16 15:04
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