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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 英文名:
Mycoplasma synoviae
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
50T
产品规格:50次
运输、保存:低温运输,-20℃保存
有效期:1年
货期:详询
PCR技术,即聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)是由美国PE Cetus公司的Kary Mullis在1983年(1993年获诺贝尔化学奖)建立的。这项技术可在试管内的经数小时反应就将特定的DNA片段扩增数百万倍,这种迅速获取大量单一核酸片段的技术在分子生物学研究中具有举足轻重的意义,极大地推动了生命科学的研究进展。它不仅是DNA分析最常用的技术,而且在DNA重组与表达、基因结构分析和功能检测中具有重要的应用价值。

实验目的
1.掌握聚合酶链式反应的原理。
2. 掌握移液枪和PCR仪的基本操作技术。
滑液支原体染料法荧光定量PCR试剂盒实验试剂与器材
模板DNA、2.5mmol/L dNTP
Taq DNA聚合酶(5U/μL)、SSR引物
10 ×buffer、15mmol/L Mg2+、ddH2O
PCR仪、移液枪、PCR板


滑液支原体染料法荧光定量PCR试剂盒特点:
2.荧光定量PCR检测,比常规PCR更加灵敏。
3.快速,整个检测过程(按一个样品计)所需时间仅为2.0小时。
4.一管式闭管操作,降低了交叉污染。
5.提供阳性标准品,便于分析实验结果。
6.对混合样品中动物成分的检测下限为0.1%,对样品中动物成分的核酸检测下限为 1.0ng/µL。
7.本只能用于科研,足够50次20uL体系的荧光定量PCR。

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文献和实验可分为荧光探针和荧光染料。荧光探针又包括Beacon技术(分子信标技术,以美国人Tagyi为代表)、 TaqMan探针(以美国ABI公司为代表)和FRET技术(以罗氏公司为代表)等;荧光染料包括饱和荧光染料和非饱和荧光染料,非饱和荧光染料的典型代表就是现在最常用的SYBR GreenⅠ;饱和荧光染料有EvaGreen、LC Green等。 嵌合荧光染料法(SYBR GreenⅠ)SYBR Green I是荧光定量PCR最常用的DNA结合染料,与双链DNA非特异性结合。在游离
进行扩增杂交,操作按试剂盒说明书进行;采用空肠弯曲菌、解尿支原体作为对照菌进行荧光定量PCR。 【注意事项】 1. 配制和使用硝酸银溶液时要格外小心,不要滴洒在地上,桌上及手上等处,氧化为黑色的液点极难去除。 2. 荧光定量PCR操作时要戴口罩及一次性手套,并尽可能在低温下操作。 思 考 题 简述荧光定量PCR的基本原理。 (曲 萍)
GreenⅠ;饱和荧光染料有EvaGreen、LC Green等。 嵌合荧光染料法(SYBR GreenⅠ) SYBR Green I是荧光定量PCR最常用的DNA结合染料,与双链DNA非特异性结合。在游离状态下,SYBR Green I发出微弱的荧光,但一旦与双链DNA结合,其荧光增加1000倍。所以,一个反应发出的全部荧光信号与出线的双链DNA量呈比列,且会随扩增产物的增加而增加。 SYBR Green I荧光染料与DNA双链









