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- XYBIO
- XY-PCR3159
- 国产
- 2026年01月09日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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100
- 英文名：
Dermacenter spp.
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
50T
产品规格：50次
运输、保存：低温运输，-20℃保存
有效期：1年
货期：详询
PCR技术，即聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）是由美国PE Cetus公司的Kary Mullis在1983年（1993年获诺贝尔化学奖）建立的。这项技术可在试管内的经数小时反应就将特定的DNA片段扩增数百万倍，这种迅速获取大量单一核酸片段的技术在分子生物学研究中具有举足轻重的意义，极大地推动了生命科学的研究进展。它不仅是DNA分析最常用的技术，而且在DNA重组与表达、基因结构分析和功能检测中具有重要的应用价值。
实验目的
1.掌握聚合酶链式反应的原理。
2. 掌握移液枪和PCR仪的基本操作技术。
革蜱染料法荧光定量PCR试剂盒实验试剂与器材
模板DNA、2.5mmol/L dNTP
Taq DNA聚合酶（5U/μL）、SSR引物
10 ×buffer、15mmol/L Mg2+、ddH2O
PCR仪、移液枪、PCR板
革蜱染料法荧光定量PCR试剂盒特点：
2.荧光定量PCR检测，比常规PCR更加灵敏。
3.快速，整个检测过程（按一个样品计）所需时间仅为2.0小时。
4.一管式闭管操作，降低了交叉污染。
5.提供阳性标准品，便于分析实验结果。
6.对混合样品中动物成分的检测下限为0.1%，对样品中动物成分的核酸检测下限为 1.0ng/µL。
7.本只能用于科研，足够50次20uL体系的荧光定量PCR。
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文献和实验，不靠壁，不贴液面。 混匀平均分装的注意事项： 1、第一管吸液前需要先把枪头在液面中浸润一下，以保证三复孔的枪头吸液量是差不多的。 2、用混匀器进行混匀，不要用移液器吹打。 详细说明书 transhold cat. A2010A0112荧光定量PCR Premix试剂盒(荧光染料) （FQ
所特有的，下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率，把引物二聚体调整到越小越好；探针法则需要设计荧光探针，这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个：完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上；这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置，根据自己试验情况而定，本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
PCR产物的荧光值就可以。参比染料的作用是标准化荧光定量反应中的非PCR震荡，校正加样误差或者是孔与孔之间的误差，提供一个稳定的基线。现在很多公司已经把ROXTM配制在MasterMix或者Premixture里。如果反应曲线良好或已经优化好反应体系，也可以不加ROXTM染料校正。通常来讲，real-time qPCR的反应程序不需要像常规的PCR那样，要变性、退火、延伸3步。由于其产物长度在80-150bp 之间，所以只需要变性和退火就可以了。SYBR@Green等染料法，最好在PCR扩增程序结束
