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PCR技术,即聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)是由美国PE Cetus公司的Kary Mullis在1983年(1993年获诺贝尔化学奖)建立的。这项技术可在试管内的经数小时反应就将特定的DNA片段扩增数百万倍,这种迅速获取大量单一核酸片段的技术在分子生物学研究中具有举足轻重的意义,极大地推动了生命科学的研究进展。它不仅是DNA分析最常用的技术,而且在DNA重组与表达、基因结构分析和功能检测中具有重要的应用价值。

实验目的
1.掌握聚合酶链式反应的原理。
2. 掌握移液枪和PCR仪的基本操作技术。
脑膜炎奈瑟菌B群染料法荧光定量PCR试剂盒实验试剂与器材
模板DNA、2.5mmol/L dNTP
Taq DNA聚合酶(5U/μL)、SSR引物
10 ×buffer、15mmol/L Mg2+、ddH2O
PCR仪、移液枪、PCR板


脑膜炎奈瑟菌B群染料法荧光定量PCR试剂盒特点:
2.荧光定量PCR检测,比常规PCR更加灵敏。
3.快速,整个检测过程(按一个样品计)所需时间仅为2.0小时。
4.一管式闭管操作,降低了交叉污染。
5.提供阳性标准品,便于分析实验结果。
6.对混合样品中动物成分的检测下限为0.1%,对样品中动物成分的核酸检测下限为 1.0ng/µL。
7.本只能用于科研,足够50次20uL体系的荧光定量PCR。

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文献和实验脑膜炎奈瑟菌的生物学特性是检验主管技师考试中所包含的内容。医学教育网收集整理了部分相关信息供学员参考。 (1)形态与染色:为革兰阴性双球菌,菌体呈肾形,成对排列,坦面相对,菌体直径0.6~1.5μm,在患者的脑脊液中位于中性粒细胞内。 (2)培养特性:营养要求高,属苛养菌,必须在含有血清或含有多种氨基酸,无机盐等物质的培养基上生长良好。 (3)生化反应:绝大多数菌株能分解葡萄糖和麦芽糖,产酸不产气(因淋病奈瑟菌不分解麦芽糖,借此与之鉴别),触酶
杆菌、产气荚膜梭菌、丙酸杆菌、念珠菌、分枝杆菌 脑膜炎奈瑟菌、卡他莫拉菌伤寒及其他沙门菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、肠杆菌属、沙雷菌、铜绿假单胞菌、假单胞菌属、不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌、洋葱伯克霍尔德菌、布氏杆菌、流感嗜血杆菌、胎儿弯曲菌、拟杆菌、梭杆菌 脑脊液 金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌A、B群链球菌、消化链球菌、炭疽芽孢杆菌、结核分枝杆菌、产单核李斯特菌、新型隐球菌、白色念珠菌 脑膜炎奈瑟菌、卡他
5.脑膜炎奈瑟菌多价血清及分群血清 6.链球菌分类诊断血清 7.肺炎链球菌诊断血清 8.耶尔森菌诊断血清 三、常用染色液 1.革兰染色液 ⑴ 结晶紫溶液 A液:结晶紫 20g,95%乙醇20 ml; B液:草酸铵 0.8g, 蒸馏水80 ml。 染色前24h将A液、 B液混合,过滤后装入试剂瓶内备用。 ⑵ 碘液:碘1g,碘化钾2g,蒸馏水300ml。










