人脑胶质瘤细胞

125I-UdR致C6胶质瘤细胞损伤的模型

一、材料：125I-UdR购自中科院北京原子能所，放化纯度>95%。脱氧腺苷（AdR）、脱氧鸟苷（GdR）、脱氧胞苷（CdR）、脱氧尿苷（UdR）均为Sigma公司产品。 二、方法 1、细胞培养：当癌细胞贴壁生长超过瓶壁的70%，用胰蛋白酶消化30-40s，传代培养。肿瘤细胞每3-4d传代1次。在50ml培养瓶中，细胞数达2×106个细胞后，取处于对数生长期的细胞进行细胞存活实验。 2、细胞存活实验：将制备好的细胞按1×105个/ml细胞接种于25ml的培养瓶中

microRNA-195通过直接影响靶基因Cyclin D1和Cyclin E1的表达 抑制了人神经胶质瘤细胞的增殖

器，它可以调节多种靶基因的表达，引起肿瘤细胞中异常信号的传递，从而影响肿瘤的增殖。先前的研究发现，与人正常的星形胶质细胞和非肿瘤组织相比，miR-195在神经胶质瘤细胞系和人的早期胶质瘤组织中表达显著下调。上调miR-195的表达显著降低了神经胶质瘤细胞的增殖。流式细胞仪分析表明，miR-195的异常表达使S期细胞的百分数明显下降，G1/G0期细胞的百分数增多。过表达miR-195也显著降低了神经胶质瘤细胞的非依赖型锚定生长能力。而且，在神经胶质瘤细胞中，过表达miR-195也降低了磷酸化视网

慢病毒载体介导红色荧光蛋白基因转染人脑胶质瘤干细胞

红色荧光蛋白（red florescence protein，RFP）是细胞研究的常用蛋白标记，是细胞生物学示踪研究中的重要标记物，荧光显微镜下可被直接观察，因此被广泛用于肿瘤的生长、浸润及血管发生等追踪性研究［。质粒转染和病毒转染是将RFP 转染到细胞内的常用方法。慢病毒作为一种较新的病毒载体，具有转染能力强、毒性小、目的基因表达稳定等优点。 通过含有红色荧光蛋白基因的慢病毒（Lentivirus）转染人脑胶质瘤干细胞，以探讨慢病毒载体介导RFP 基因转染标记人脑胶质瘤干细胞的转染