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上海烜雅生物科技有限公司
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PCR技术,即聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)是由美国PE Cetus公司的Kary Mullis在1983年(1993年获诺贝尔化学奖)建立的。这项技术可在试管内的经数小时反应就将特定的DNA片段扩增数百万倍,这种迅速获取大量单一核酸片段的技术在分子生物学研究中具有举足轻重的意义,极大地推动了生命科学的研究进展。它不仅是DNA分析最常用的技术,而且在DNA重组与表达、基因结构分析和功能检测中具有重要的应用价值。

实验目的
1.掌握聚合酶链式反应的原理。
2. 掌握移液枪和PCR仪的基本操作技术。
致泻性大肠埃希氏菌五重PCR试剂盒实验试剂与器材
模板DNA、2.5mmol/L dNTP
Taq DNA聚合酶(5U/μL)、SSR引物
10 ×buffer、15mmol/L Mg2+、ddH2O
PCR仪、移液枪、PCR板


致泻性大肠埃希氏菌五重PCR试剂盒特点:
1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板。
2.引物和探针经过优化,灵敏性高,能达到 100 拷贝/反应。
3.提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4.特异性高。
5.既可用于定性检测,又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为 5 各数量级。
6.本产品足够 50 次 20μL 体系的探针法荧光定量 PCR 反应。
7.本产品只能用于科研。

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文献和实验被抗甲5型(H5)病毒血清抑制而不被抗甲1或抗甲3病毒血清抑制的甲型流感病毒),须立即上报国家流感中心,WHO总部或任一WHO流感协作中心。 2、霍乱滤液(RDE)处理标准抗血清去除非特异性抑制素 (可用WHO普通流感试剂盒提供的RDE) (1)用1ml蒸馏水溶解冻干甲5型(H5)病毒抗血清,溶解后的血清可于-20℃或-70℃保存。 (2)用25ml无菌生理盐水溶解RDE,分装包存。 (3)1份血清加3份RDE(0.1ml血清加0.3mlRDE),混合后37℃水浴过液。 (4)56℃
输卵管转移前一天晚上与切除输精管小鼠交配的假孕母鼠,注射当天早上母鼠可见精栓。尽管像Swiss Webster系的哺育母鼠很容易超重,随着体重的增加,它们将表现出不同程度的感觉消失,但它们是优良的哺育母鼠。另外,它们的价格也便宜。另一个成功的鼠系是B6D2F1,它们生命力强并有一定杂合优势。(3)麻醉剂:阿佛丁被证明是输卵管转移手术的有效麻醉剂。(三)实验操作程序和方法1.鼠系克隆(1) 动情期的探测:在转基因动物模型的建立中母鼠动情期的监测有很高的技巧性。小鼠的动情期主要划分为四个时期:① 动情
,每一次循环所产生的DNA均能成为下一次循环的模板,每一次循环都使两条人工合成的引物间的DNA特异区拷贝数扩增一倍,PCR产物得以2n 的批数形式迅速扩增,经过25~30个循环后,理论上可使基因扩增109 倍以上,实际上一般可达106 ~107 倍。 假设扩增效率为“X”,循环数为“n”,则二者与扩增倍数“y”的关系式可表示为:y=(1+X)n 。扩增30个循环即n=30时,若X=100%,则y=230 =1073741824(>109 );而若X=80%时,则y=1.830










