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EZProbe One Step qRT-PCR Probe Kit (ROX1 plus)
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北京百奥创新科技有限公司
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EZBioscience®EZProbe One Step qRT-PCR Kit (ROX1 plus) 是一种使用荧光探针定量 RNA 的一步法试剂盒。除引物、探针和模板外,该试剂盒在两个小瓶中包含执行快速、灵敏和可重复的 qRT-PCR 所需的所有组件。 20× EZProbe One Step Enzyme Mix 含有 M-MLV (RNase H-) 逆转录酶、RNase 抑制剂和热启动 DNA 聚合酶; 2× EZProbe One Step Buffer 包含 dNTP、Oligo dT18、随机六聚体、优化缓冲液和 ROX1。 M-MLV 逆转录酶是一种 RNA 依赖性 DNA 聚合酶,其 RNase H 活性显着减弱,可在 42°C 至 60°C 的温度范围内合成 cDNA,并在热启动 DNA 的激活步骤中失活聚合酶。 RNase inhibitor 可以保护 RNA 模板不被降解。 该缓冲液已经过优化,允许逆转录和 PCR 扩增在同一个反应中跨多种模板进行。 热启动 DNA 聚合酶需要在 95°C 下激活 5 分钟,以防止 cDNA 合成过程中的非特异性扩增。
产品组分
| Components |
EZB-RTProbe-R1-S (100 Rxns) |
EZB-RTProbe-R1 (500 Rxns) |
| 20× EZProbe One Step Enzyme Mix*1 |
100 μl |
500 μl |
| 2× EZProbe One Step Buffer*2 |
1 ml |
5 ml |
*1:含有逆转录酶、RNase Inhibitor、Hot Start DNA Polymerase。
*2:包含 dNTP、Oligo dT18、随机六聚体、优化缓冲液和 ROX1。 ROX1 预混液用于校正不同孔间荧光信号的误差。
试剂保存条件
试剂盒应储存在 -20°C 并避光。避免反复冻融。在推荐的储存条件下,本产品的质量可以保证 18 个月。
实验结果
图1。检测了来自 SARS-CoV-2-假病毒的连续稀释 RNA 中的 GAPDH mRNA 表达水平。上面的扩增图表明目标基因可以有效且特异性地扩增。
一、辐射五大服务方向:
国内试剂耗材经销代理;国外试剂订购(直订或境外代理);基因组测序(二代、二代+三代);基因分型(SNP检测):低/中/高通量项目;生物样本运输;
二、多家授权代理品牌,涉及30多种,经营代理500多个品牌:
EZBioscience、Intact Genomic、Sigma、Epigentek、ThermoFisher、DNA Genotek、USA Scientific......
所有生物试剂耗材都可以进口,特别是冷门品牌,价格优,货期短,可加急。大部分客户我们提供货到付款服务,百奥创新自成立依靠过硬的服务和良好的信誉与各大企事业单位、科研单位建立长期合作。
专业订购国内外试剂耗材,常备现货,一手货源,欢迎合作
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文献和实验The final working concentration of ROX Standard in the PCR buffer is 0.5 µMolar (1X). SYNTHEGEN's ROX Standards are shipped in liquid form at a concentration of 100 µMolar (200X).
扩增曲线的分析攻略。 1、确认软件设置是否正确 对照试剂盒说明书,检查时间、温度、循环数、荧光采集等是否设置正确。有一个比较容易忽略的设置问题是,需要看下所选用的试剂中是否含有 ROX 来作为参比荧光染料。Applied Biosystems™ 系列荧光定量 PCR 仪器可以用 ROX 来作为参比荧光染料,用以校正仪器系统以外的物理误差,比如均一化校正由于移液误差或者蒸发导致的批内体积误差等。目前市面上有的的荧光定量 PCR 预混液是不含有 ROX 的,当用此类试剂的时候,应该将 ROX 参比
%,避免引物内含有互补序列,3』端尽量不要出现含有连续三个以上的 G 或 C 的片段,真核基因设计引物时最好跨内含子哦。 选择合适 ROX 参照染料 各位同学在选购产品、做实验时,首先要弄清自己实验室的仪器对应哪种 ROX(High 还是 Low)!试剂买回来,样也加好了,最后发现不能用在自家仪器上,内心也一定是很崩溃。诺唯赞的染料法荧光定量专用预混液提供各种 ROX 供选择,如果不想这么麻烦,ChamQTM Universal SYBR® qPCR Master Mix (Q711)那是极好
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