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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温保存
- 保质期:
6个月
- 英文名:
C1含量测试盒
- 库存:
337
- 供应商:
江西江蓝纯生物有限公司
- 规格:
100管/48样
测定方法:微量法
测定规格:100管/48样
保存条件:低温避光保存
测定意义:
C1(EC3.2.1.91)存在于细菌、真菌和动物体内,是纤维素酶系的组份之一,C1催化多聚糖链的末端非还原端释放出纤维二糖和葡萄糖。
测定原理:
采用3,5-二硝基水杨酸法测定C1催化微晶纤维素降解产生的还原糖的含量。
需自备的仪器和用品:
酶标仪/可见分光光度计、水浴锅、离心机、可调式移液器、96孔板/微量石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
样品测定的准备:
1、细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2、组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
3、血清(浆)样品:直接检测。
注 意 :正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
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文献和实验纤维素是地球上最丰富的可再生有机资源,其生物降解完全是微生物--细菌和真菌完成的。1、真菌:分泌胞外游离的纤维素酶,以水解酶机制和氧化酶机制降解纤维素。2、细菌纤维素酶则是以形成多酶复合体结构而起作用,能更加彻底有效地降解天然纤维素。纤维素完全降解需要三类酶的协同作用:内切葡聚糖酶、外切葡聚糖纤维二糖水解酶、B-葡萄糖苷酶。目前、纤维素酶的研究热点有:1、以纤维素为添加剂 生产可完全降解的塑料。存在的问题是高产完整活性的工程菌的获得存在困难,对纤维素酶基因克隆酵母分泌表达系统是目前研究的热点
一、目的 学习和掌握3,5-二硝基水杨酸(DNS)法测定纤维素酶活力的原理和方法,了解纤维素酶的作用特性。 二、原理 纤维素酶是一种多组分酶,包括C 1 酶、C X 酶和¦Â-葡萄糖苷酶三种主要组分。其中C1酶的作用是将天然纤维素水解成无定形纤维素,C X 酶的作用是将无定形纤维素继续水解成纤维寡糖,¦Â-葡萄糖苷酶的作用是将纤维寡糖水解
DNA连接酶是1967年在三个实验室同时发现的。它是一种封闭DNA链上缺口酶,借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA链的5'-PO4与另一DNA链的3'-OH生成磷酸二酯键。但这两条链必须是与同一条互补链配对结合的(T4DNA连接酶除外),而且必须是两条紧邻DNA链才能被DNA连接酶催化成磷酸二酯键。常用的DNA连接酶有两种:来自大肠杆菌的DNA连接酶和来自噬菌体的T4DNA连接酶。二者的作用机理类似。1) T4DNA连接酶作用机制:T4连接酶作用分三步:(1) T4DNA连接酶与辅助











