- ￥4025
- 江蓝纯生物
- 国内
- JLC-G7504
- 2025年07月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温保存
- 保质期：
6个月
- 英文名：
CS含量测试盒
- 库存：
244
- 供应商：
江西江蓝纯生物有限公司
- 规格：
100管/48样
测定方法：微量法
测定规格：100管/48样
保存条件：低温避光保存
测定意义：
CS（EC 2.3.3.1）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体基质中，是三羧酸循环个限速酶，是三羧酸循环主要调控位点之一。
测定原理：
CS 催化乙酰 CoA 和草酰乙酸产生柠檬酰辅酶 A，进一步水解产生柠檬酸；该反应促使无色的 DTNB 转变成的 TNB，在 412nm 处有特征吸光值。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰、无水乙醇和蒸馏水
样本的前处理：
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离：
①称取约 0.1g 组织或收集 500 万细胞，加入 1mL 试剂一和 10uL 试剂三，用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
②将匀浆 600g，4℃离心 5min。
③弃沉淀，将上清液移至另一离心管中，11000g，4℃离心 10min。
④上清液即胞浆提取物，可用于测定从线粒体泄漏的 CS（此步可选做）。
⑤在步骤④的沉淀中加入 200uL 试剂二和 2uL 试剂三，超声波破碎（冰浴，功率 20％或200W，超声 3 秒，间隔 10 秒，重复 30 次），用于线粒体 CS 测定。
注 意：正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
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文献和实验抑制。 dNTP浓度低时PCR产率及特异性均增高，适合于用扩增掺入法标记生物素及放射性元素。当100μl PCR液中含dNTP各40μmol/L时就足以合成2.6μg的DNA（dNTP消耗一半）。 表22-3 有机溶剂对Taq聚合酶活力的影响 用鲱精DNA，70℃，10min内dNTP的掺入量计算，标准条件为100%。 纯9.4KDa Taq酶不含3’→5’核酸外切酶活力。误掺入率取决于dNTP浓度。但Taq酶具有DNA依赖的链移位5’→3’核酸外切酶活力。对5’→
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