- ￥805
- 江蓝纯生物
- 国内
- JLC-G7415
- 2025年07月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温保存
- 保质期：
6个月
- 英文名：
NBT法含量测试盒
- 库存：
155
- 供应商：
江西江蓝纯生物有限公司
- 规格：
100管/96样
测定方法：微量法
测定规格：100管/96样
保存条件：低温避光保存
测定意义：
SOD（EC 1.15.1.1）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化超氧化物阴离子发生岐化作用，生成 H2O2 和 O2。SOD 不仅是超氧化物阴离子清除酶，也是 H2O2 主要生成酶，在生物抗氧化系统中具有重要作用。
测定原理：
通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子(O2-)，O2-可与 WST-8 反应产生水溶性染料甲臜，后者在 450nm 处有吸收；SOD 可清除 O2-，从而抑制了甲臜的形成；反应液越深，说明 SOD 活性愈低，反之活性越高。
需自备的仪器和用品：
酶标仪、离心机、移液器、96 孔板、研钵、冰和蒸馏水
测定步骤：
1、 酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 450nm。
2、 试剂三的稀释：将试剂三用蒸馏水稀释 50 倍，用多少配多少。（试剂三和蒸馏水 1：49稀释。
3、 工作液配制：在试剂一加入 100μL 试剂二，充分混匀。配的试剂 4℃避光可保存一周。（若一次性测定样本较少，可按照实际用量将试剂一和试剂二按照 20mL：0.1mL 的比例混匀配制）
4、 将一瓶试剂四用 5mL 蒸馏水溶解（溶解后一周内用完）。
注 意：正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
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文献和实验相关专题 一、原理 超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）普遍存在于动、植物 体内，是一种清除超氧阴离子自由基的酶，它催化下列反应： 2O +2H →H O +O 本反应产物H O 可由过氧化氢酶进一步分解或被过氧化物酶利用。 本实验依据超氧化物歧化酶抑制氮蓝四唑（NBT）在光下的还原作用来确定酶活性大小。在有氧化物质存在下，核黄素可被光还原，被还原的核黄素在有氧条件下极易再氧化而产生超氧阴离子自由基，超氧阴离子
，WST-1灵敏度高，氧化态的吸光度低，水溶性好，因此，最适合用来做SOD检测。这种用WST-1来检测SOD的方法可以被用于鼠红血球、心脏、肝脏等生化样品中。我们还发现了一种使用了WST-1的流式注射法检测SOD的检测系统，通过这个系统能够进行快速的检测（每小时可以检测30个样品）。 常用的几种SOD检测方法： 1.分光光度法 分光光度法是最为典型的检测SOD的方法，这种方法使用了细胞色素 C(cytochrome C)或者氮蓝四唑（NBT）（图1）。用cytochrome
有3种, 包括氮蓝四唑(NBT)光化还原法，邻苯三酚自氧化法，化学发光法。本实验主要介绍光化还原法，其原理是：氮蓝四唑在蛋氨酸和核黄素存在条件下，照光后发生光化还原反应而生成蓝色甲腙，蓝色甲腙在560nm处有最大光吸收. 。SOD能抑制NBT的光化还原，其抑制强度与酶活性在一定范围内成正比。 试剂: 1.50m mol/l pH7.8的磷酸缓冲液(PBS) 。含0.1m mol/l
