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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温保存
- 保质期:
6个月
- 英文名:
GSH含量测试盒
- 库存:
139
- 供应商:
江西江蓝纯生物有限公司
- 规格:
100T/96S
测定方法:微量法
测定规格:100T/96S
保存条件:低温避光保存
测定意义:
GSH是细胞内主要的抗氧化巯基物质,在抗氧化、蛋白质巯基保护和氨基酸跨膜运输等中具有重要作用。还原型与氧化型比值(GSH/GSSG)是细胞氧化还原状态的主要动态指标。因此,测定细胞内GSH和GSSG含量以及GSH/GSSG比值,能够很地反映细胞所处的氧化还原状态。
测定原理:
DTNB与GSH反应生成复合物,在412nm处有特征吸收峰;其吸光度与GSH含量成正比。
自备仪器和用品:
低温离心机、水浴锅、可调节移液器、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、和蒸馏水。
GSH测定操作:
1. 分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长到412 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二置于25℃(一般物种)或者37℃(哺乳动物)水浴中保温30min。
3. 空白管:取微量玻璃比色皿或96孔板,依次加入20μL蒸馏水,140μL试剂二,40μL试剂三,混匀静置2min后测定412 nm吸光度A1。
4. 测定管:取微量玻璃比色皿或96孔板,依次加入20μL上清液,140μL试剂二,40μL试剂三,混匀静置2min后测定412 nm吸光度A2。
注 意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
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文献和实验GSH和GSSG 参照 Anderson等 (1992)。取0.5 g样品,加入3 mL冰冷的6%的偏磷酸(含1 mmol•L-1 EDTA , pH 2.8),冰浴研磨,匀浆液以20,000 g,4 ℃离心15 min,取上清液来马上测定GSH和GSSG的含量或储存在-20 ℃下等待测定。总的GSH和GSSG含量测定如下:200 μL提取液加 1.2 mL反应液包含400 μL反应液1(110 mmol•L-1 Na2HPO4•7H20, 40 mmol•L-1 NaH2PO4•H2
表达载体,GST 标签预装柱及填料,GST 检测试剂盒及一系列位点特异性的蛋白酶。 通常酶切后可以得到非常纯的目标蛋白。如果对纯度仍有更高的要求,也可以结合离子交换或分子筛进行精纯。 Cytiva针对9种不同纯化应用,推出相应的层析组合产品,订购推荐的两步纯化或三步纯化套餐,即可获得精选填料或预装柱一份(52 种,任您选择),加速您的蛋白质研究! 详情请查看:https://h.dxy.cn/Cytivasales/kz/dbzyj
「参考值」 高铁血红蛋白还原75%以上。 「临床意义」 红细胞内6-磷酸葡萄糖脱氢酸酶(G-6PD)在磷酸戊糖旁路糖代谢中能使6-磷酸葡萄糖变为6-磷酸葡萄糖酸,同时使三磷酸吡啶核苷(TPN)变成还原型三磷酸吡啶核苷(TPNH),TPNH可使氧化型谷胱甘肽(GSSG)变成还原型谷胱甘肽(GSH)并使高铁血红蛋白(HbFe+++)还原成低铁血红蛋白(HbFe++)。本试验用亚硝酸钠使HbFe++氧化为HbFe+++(暗棕色)以美蓝的递氢作用加强磷酸戊糖旁路的糖











