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无锡云萃生物
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云萃
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文献和实验Two-hybrid analysis of genetic
plates lacking uracil,histidine,and tryptophan (-u-h-w Glu X-Gal),see Chapter 4. Minimal X-Gal galactose/raffinose plates lacking uracil,histidine,and tryptophan (-u-h-w Gal/Raf X-Gal),see Chapter 4 Replica plater and sterile replica velvets Optional
酵母细胞。 3. 构建DNA-BD/靶蛋白质粒pLexA-X，作为钓饵(bait)。 4. 将上述钓饵质粒pLexA-X转化EGY48(p8op-LacZ)细胞株，用SD/-His/-Ura筛选;并用固体诱导培养基SD/Gal/Raf/-His/-Ura检测此DNA-BD/靶蛋白是否具有直接激活报告基因的活性，以及对酵母细胞是否具有杀伤毒性。 转化质粒 选择培养基 克隆生长情况 说 明 (含有Gal/Raf) pLexA-Pos SD/-His，-Ura
EXAMINING THE FUNCTION OF PROTEINS AND PROTEIN NETWORKS WITH THE YEAST TWO-HYBRID SYSTEM
(see below). 7. Test for lacZ expression. One way to do this is simply to patch individual transformants from step 2 to Gal/Raf ura-his- trp- X-Gal plates (about 1 cm x 1 cm patches) and incubate at 30oC. Yeast with a control LexA-activator fusion should turn
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