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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温保存
- 保质期:
6个月
- 英文名:
GOD含量测试盒
- 库存:
164
- 供应商:
上海机纯实业有限公司
- 规格:
100管/48样

注 意 :正式测定前取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
GOD(EC 1.1.3.4)广泛存在于动物、和植物中,催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸,并产生H2O2,是生物体中产生活性氧的代谢途径之一。
测定原理:
GOD催化产生H2O2,过氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替比林偶联酚,生成有色化合物,在500 nm有特征吸收峰,颜色深浅与GOD活性成线性关系。
试验中所需的仪器和设备:
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰、蒸馏水
试剂的组成和配制:
提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存;
缓冲液:液体30mL×1瓶,4℃保存;
试剂一:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入10mL缓冲液充分溶解待用;用不完的试剂4℃保存一个月;
试剂二:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入10mL缓冲液充分溶解待用;用不完的试剂4℃保存一个月;
样品测定的准备:
1、细菌、细胞或组织样品的制备:
细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2、血清(浆)样品:直接检测。‘

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文献和实验505nm比色,其色泽深浅与葡萄糖浓度成正比。评价:准确度、精密度、灵敏度和稳定性良好是目前血糖测定的首选方法。GOD催化的反应特异,只有葡萄糖反应,POD不特异受干扰因素较多,如血中有还原性物质,如尿酸、维生素C、胆红素和谷胱甘肽等可使H202还原为H2O,可致结果偏低。(2)葡萄糖氧化酶-氧速率法(GOD-OR法):葡萄糖氧化酶每氧化标本中的一分子葡萄糖便消耗一分子氧,用氧敏感电极测定氧消耗速率,便可知葡萄糖含量。此法准确性和精密度都很好,但只能用于特殊的分析仪。(3)已糖激酶法(HK法
沉淀必须稳定,即终产物不能从酶活性部位向周围组织弥散,影响组织学定位;③较易获得的酶分子,最好有商品出售;④中性pH时,酶应稳定,酶标记抗体后,保存1~2年活性不应改变,且酶的催化活性(Turnover)越高越好;⑤酶标过程中,酶与抗体连结,不能影响二者的活性;⑥被检测组织中,不应存在与标记酶相同的内源性酶或类似物质。 其中,①②两点甚为重要,因为并非容易显示的酶均能形成不可溶性的复合物。一般认为,辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase , HRP)较佳,是最常
电极(测氧的消耗)、过氧化氢电极(测H2O2的产生))和pH电极(测酸度变化)来间接测定葡萄糖的含量。因此只要将GOD固定在上述电极表面即可构成测葡萄糖的GOD传感器。这便是所谓的第一代酶电极传感器。这种传感器由于是间接测定法,故干扰因素较多。第二代酶电极传感器是采用氧化还原电子媒介体在酶的氧化还原活性中心与电极之间传递电子。第二代酶电极传感器可不受测定体系的限制,测量浓度线性范围较宽,干扰少。现在不少研究者又在努力发展第三代酶电极传感器,即酶的氧化还原活性中心直接和电极表面交换电子的酶电极传感器。目前










