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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Human HELQ expression plasmid,C-HA
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:HELQ
反应种属:Human
应用说明:Stable or Transient mammalian expression
GeneBank ID:NM_001297755.1
序列长度:3147
载体:pCMV3-C-HA
cDNA描述:Full length Clone DNA of Human helicase, POLQ-like
标签序列:HA Tag Sequence: TATCCTTACGACGTGCCTGACTACGCC
酶切位点:KpnI + NotI(6kb+3.15kb)
质粒:pCMV3-HELQ-t2-HA
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文献和实验Hi guys, I have a question for you. I made a construct which had been sequenced. It is in pcDNA3.1(+) and with HA-TAA to stop. The right size for endogenous protein is 31kD. But when I transfected into COS-7 and run western, the size
。但是有一点我可以有很大把握的说:对于真核表达,密码子优化只能起锦上添花的作用(确认有表达,以此来提高表达量),而不能雪中送炭(没有表达出来,通过密码子优化极有可能不奏效)。 4、质粒不稳定或者质粒丢失。pET系统通常比较稳定。但是你选用带氨苄青霉素抗性的载体时,也许有可能产生β-lactamase降解了抗生素,使质粒丢失。还有一种情况是表达重组的毒素蛋白,对宿主细胞也有毒性,造成质粒丢失。这种情况多见于真核表达系统。 5、蛋白酶将蛋白降解了。这种情况常由重组蛋白本身的N-或C-端序列引起
1. 引言 传统的观点认为真核生物基因的表达是由位于同一分子(顺式元件)上的 DNA 序列与不同 DNA 分子(反式作用信号)编码的蛋白质或 RNA 之间的相互作用来调控的。这些顺式作用元件包括 CAAT 框和 TATA 框、启动子本身的响应元件、编码区远上游或下游端的增强子元件、5' 及 3' 非编码区(UTR ) 、内含子、多聚腺苷酸信号等。然而,这个相当简单的观点一直受到怀疑,特别是随着人们对哺乳动物生物学知识了解的逐步深入,该观点也得到更新和完善。(见示例
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