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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海晶抗生物工程有限公司
- 库存:
268
- 样本:
来电咨询
- 标记物:
详见说明书
- 适应物种:
来电咨询
- 应用:
仅供科研研究使用
- 检测方法:
微量法
二磷酸核酮糖羧化酶(Rubisco)测试盒_微量法
测定方法:微量法
产品规格:100管/96样
储存条件:低温保存
注 意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
二磷酸核酮糖羧化酶(EC 4.1.1.39)是植物光合作用中的一个关键酶,既控制着CO2的固定,同时又制约着碳素向Calvin循环和光呼吸循环分流,其活性的大小直接影响着光合速率。
测定原理:
在Rubisco的催化下,1分子的核酮糖-1,5-二磷酸(RuBP)与1分子的CO2结合,产生2分子的3-磷酸甘油酸(PGA),PGA可通过外加的3-磷酸甘油酸激酶和甘油醛-3-磷酸脱氢酶的作用,产生甘油醛-3-磷酸,并使还原型辅酶I(NADH)氧化。因此,340nm吸光度的变化可计算还原型辅酶I氧化速率,还原型辅酶I氧化速率可反应Rubisco的活性。
需自备的仪器和用品:
分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制:
提取液一:液体100mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液体100mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:25mL×1瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入10mL试剂一,充分混匀待用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;
试剂三:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入10mL试剂一,充分混匀待用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;
试剂四:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入1 mL试剂一,充分溶解待用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;
(注意:试剂二、三、四溶解后,按需分装-20℃保存。)
测定步骤:
- 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
- 样本测定
- 工作液的配制:临用前将试剂二和试剂三1:1混合,用多少配多少;
- 在微量石英比色皿或96孔板中加入10uL样本、10uL试剂四和180uL工作液,混匀,立即记录340nm处20s时吸光值A1和5min20s时的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
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文献和实验尔化学奖。(一)C3途径的反应过程C3途径是光合碳代谢中最基本的循环,是所有放氧光合生物所共有的同化CO2的途径。1.过程 由RuBP开始至RuBP再生结束,共有14步反应,均在叶绿体的基质中进行。全过程分为羧化、还原、再生3个阶段。(1)羧化阶段(carboxylation phase) 指进入叶绿体的CO2与受体RuBP结合,并水解产生PGA的反应过程。以固定3分子CO2为例:3RuBP+3CO2+3H2O PGA + 6H+核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶(Rubisco)具有双重功能,既能使RuBP
经膜上的运转器(translocator)才能通过;蔗糖、C5`C7糖的二磷酸酯、NADP+、PPi等物质则不能通过。2.基质及内含物 被膜以内的基础物质称为基质(stroma),基质以水为主体,内含多种离子、低分子的有机物,以及多种可溶性蛋白质等。基质是进行碳同化的场所,它含有还原CO2与合成淀粉的全部酶系,其中1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(ribulose1,5bisphosphate carboxylase/oxygenase,Rubisco)占基质总蛋白的一半以上。此外,基质中含有氨
|鱼藤酮 Rous sarcoma virus|Rous肉瘤病毒 rubella virus|风疹病毒 rubidomycin|红比霉素 rubisco|核酮糖二磷酸羧化酶-加氧酶 rubredoxin|玉红氧还蛋白[一种不含血红素的铁蛋白] ruffling|[细胞]边缘波动 ruminant|反刍动物;反刍(动物)的 rutin|芸香苷,芦丁








