滤纸酶测试盒_微量法

滤纸酶测试盒_微量法
测定方法：微量法
产品规格：100管/48样
储存条件：低温保存
测定意义：
纤维素酶是由微生物产生的多组分的酶系，能水解纤维素β-1,4葡萄糖苷键生成葡萄糖，研究滤纸酶活力对纤维素酶的研究具有非常重要的意义。

测定原理：
滤纸酶水解滤纸产生的还原糖能与3,5-二硝基水杨酸生成红棕色氨基化合物，在540nm处有大光吸收，在一定范围内反应液颜色深浅与还原糖的量成正比，可测定计算得滤纸酶的活力。

自备实验用品及仪器：
天平、研钵、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、恒温水浴锅。

试剂组成和配制：
试剂一：液体25mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体40mL×1瓶，4℃保存。
滤纸条：50mg×50条。




测定操作：

1. 根据样本数量取两倍数量的滤纸条和Ep管，每支Ep管中放入一个卷状滤纸条（注意要放入底部），作为底物。
2. 对照管：取200μL灭活的酶液，加入500μL试剂一，充分混匀，再加入放有滤纸条的Ep管中，标注为对照管。
3. 测定管：取200μL酶液，加入500μL试剂一，充分混匀，再加入放有滤纸条的Ep管中，标注为测定管。
4. 对照管和测定管同时置于50℃水浴锅中反应30min。
5. 加入800μL试剂二，沸水浴5min，自来水冷却后取200μL于微量石英比色皿/96孔板中测定540nm处吸光值，分别记为A对照管和A测定管，△A= A测定管- A对照管。