0.5ml冷冻管，可站立，透明色，聚丙烯，伽玛射线消毒，不带

实用哺乳动物细胞培养手册（下）

注意：（1）解冻时务必注意安全，预防冷冻管爆裂。，要带手套，用镊子将细胞冷冻管从液氮中取出，放入 37℃ 水浴中。切不可直接用手，以免冻伤。（2）冷冻管在水浴中解冻时，液面不可超过冻存管盖面，否则，易发生污染。解冻冷冻保存细胞的离心方法:(1) 从液氮中取出冻存的细胞，立即放入 37℃ 水浴中快速解冻。（2）将 1－2 ml 冻存细胞液加入到 25 ml 新鲜完全细胞生长培养液中，轻轻混匀。（3）用 80 g 离心 2－3 分钟，弃上清液。（4）用完全生长培养液轻轻悬浮细胞团，并计数细胞。（5）接种细胞到培养

细胞培养完整手册

和活细胞数，计细胞活力。 死细胞能被台盼兰染上色，镜下可见深兰色的细胞，活细胞不被染色，镜下呈无色透明状。 活力测定可以和细胞计数合起来进行，但要考虑到染液对原细胞悬液的加倍稀释作用 。范例： T75 monolayer culture 制成10ml 细胞悬浮液，取0.1 ml 溶液与0.1ml trypan blue 混合均匀于试管中，取少许混合液加入血球计数盘，计数四大方格内之 细胞数目。 活细胞数/方格：55 ,62, 49, 59 死细胞数/方格：5, 3, 4, 6 细胞

细胞培养基本技术

计数板及盖片擦拭干净，并将盖片盖在计数板上。 2、将细胞悬液吸出少许，滴加在盖片边缘，使悬液充满盖片和计数板之间。 3、静置3分钟。 4、镜下观察，计算计数板四大格细胞总数，压线细胞只计左侧和上方的。然后按下式计算： 细胞数/ml＝4大格细胞总数/ 4×10000 注意：镜下偶见由两个以上细胞组成的细胞团，应按单个细胞计算，若细胞团占10%以上，说明分散不好，需重新制备细胞悬液。 培养细胞活力测定 任何培养瓶内生长的细胞都由死细胞和活细胞组成，从形态上区别死、活细胞是困难的。 在细胞群体中