淀粉脱分支酶(DBE)测试盒_微量法

淀粉脱分支酶(DBE)测试盒_微量法
测定方法：微量法
产品规格：100管/48样
储存条件：低温保存
注    意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
DBE能够专一性地裂解支链淀粉的α-1，6糖苷键，产生线性的葡萄糖链，在调整支链淀粉分子的链长方面有重要的作用。

测定原理：
采用3，5-二硝基水杨酸法测定DBE催化支链淀粉产生的还原糖，通过测定还原糖含量的变化来计算DBE活性。

需自备的的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰、蒸馏水

试剂的组成和配制：
提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存；
试剂一：液体15mL×1瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂×1支，4℃保存；临用前每支加入6mL试剂一，充分混匀后备用；用不完的试剂4℃保存；
试剂三：液体12mL×1瓶，4℃保存；
试剂四：液体35mL×1瓶，4℃保存。




测定步骤：
1、分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长到540 nm，蒸馏水调零。
2、加样表

试剂名称（μL）	对照管	测定管
95℃水浴5min后灭活的样本	100
粗酶液		100
试剂一	100
试剂二		100

混匀，37℃准确保温2h

试剂三	100	100
试剂四	300	300

混匀，95℃水浴5min，取200uL至微量石英比色皿或96孔板中，540nm处读取各管吸光值。ΔA=A测定
-A对照。每个测定管需设个一个对照管。
注意：可以在不同对照管中加入不同样品的粗酶液，然后集中进行5min 95℃沸水浴处理。