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- 2025年07月11日
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999
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现货
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500个/包，8包/箱
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文献和实验-RAD）， PCR仪 My Cycler （Bio-RAD），Direct-Pure UP 超纯水系统（RephiLe），核酸电泳仪 EPS100 (上海天能)。细菌基因组 DNA 提取试剂盒（Axygen），dNTP （Takara）三、试验方法1. 样品制备和增菌培养 接种前，先将增菌培养基煮沸 10 ~ 15 min，以排除溶解于培养基中的氧，并迅速冷却，切勿摇动。每 15 ml 增菌肉汤中接种 1 ~ 2 g 固体食品或 1 ~2 ml 液体食品，接种时将接种物慢慢接入肉汤液面以下。每份样品接种
的数值应在 1.8～2.0 之间，并将其浓度调整至 100 ng/ul，-20 °C 保存。2 Genome-walking 文库建立（1）取 4 个 1.5 mL EP 管，做好标记（Dra I、Stu I、Pru II 和 EcoR V），分别依次加入：（2）轻弹混匀，勿涡旋，以免 DNA 断裂。37 °C 孵育 2 h。轻弹混匀，重新置于 37 °C 过夜（16～18 h）。（3）从每个反应管中分别取 5 ul 酶切产物，进行 1.5% 琼脂糖凝胶电泳，并取 5 ul 的纯化基因组作为对照
素/100mg/ml链霉素，临用前加入10%或20%FCS（v/v，胎牛血清），用1N NaHCO3调节pH值7.4，抽滤灭菌后4℃保存。 6、0.25%胰蛋白酶（DMEM配）胰蛋白酶250mgDMEM 100ml 抽滤分装小青瓶，-20℃冻存 7、0.25%胰蛋白酶（RPMI 1640配）胰酶250mg，加RPMI 1640 100ml，用0.1N NaHCO3调节pH至7.4，灭菌后4℃保存。 8、 Hank’s平衡盐溶液：5.4mM KCl, 0.3mM Na2HPO4, 0.4mM KH
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