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麦飞生物
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现货
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/
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10盒/包,5包,箱
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文献和实验DNeasy 96植物技术:使用搅拌磨MM 300从新鲜植物叶片中分离DNA
. Allow the centrifuge to reach 3000 rpm, and then stop the centrifuge. Do not prolong this step (用新盖子小心将微型管盖上,确保微型管密封好,不会在震摇过程中泄露。将一个透明盖(自步骤1 留下的)盖在微型收集管架上,上下剧烈震摇15 s 。收集盖子里的溶液,将收集微型管进行离心,使转速达到3000 rpm 并停止离心。不要延长这步的时间)。Note: To ensure optimal DNA yields
水至25 ul。 混匀,置于SLAN荧光定量PCR仪中。95℃5min预变性后,95℃15 s→65℃35 s(荧光检测),40 cycles。荧光定量PCR一般把退火和扩增设成一个温度,只在扩增出现问题时才会考虑设梯度。 (侯哥论文中的:95 °C 10分钟→95 °C 15秒→60 °C 1分钟;40个循环。) 以双△Ct值法计算靶基因相对表达水平: GRP78相对表达水平=2-△(△CT
4 Polynucleotide Kinase: NEB M0201S Gamma 32P ATP, 6000 Ci/mmol, 150 mCi/mL PerkinElmer (cat# NEG035C005MC) MicroSpin G-25 columns: Amersham 27-5325-01 (cellculture) Wash buffer: 2xSSC/0.1%SDS 50 mL 20x SSC + 447.5 mL autoclaved H2O + 2.5 ml
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