MCT-150-O AXYGEN 1.5ml桔色离心管

SDS法提取植物基因组DNA

/L KAc(4) RNaseA 10mg/ml(5) 异丙醇(6)灭菌ddH2O或TE3. 仪器: 离心机， 恒温水浴, 台式高速离心机，电泳装置二 实验程序1取幼嫩的组织材料1-2g,用蒸馏水冲洗干净，再用灭菌ddH2O冲洗2次，放入经液氮预冷的研钵中，加入液氮研磨至粉末状，用干净的灭菌不锈钢勺转移粉末到加有500μL提取液的离心管中,轻轻混匀。2 向管中加入50μL20%SDS溶液，混匀，不可过于强烈震荡以防基因组DNA断裂 ，65℃保温10min，并不时摇动。3 加入150μL 5mol

有图有真相，专业技术工程师带你一起轻松玩转 ChIP 实验

个细胞。考虑到我们后续还要对酶切用量进行优化，实际准备了足量细胞（每组约 1.5×107 个细胞）。在我们实验前，我们仔细观察了细胞的状态和密度，细胞状态很健康，贴壁良好，也达到了 80% 左右的汇合率，一切都符合 ChIP 实验的要求。拿出试剂盒，我们首先对各种标配试剂置于冰浴中进行了标记。由于试剂盒标配的 DTT 为干粉，因此我们需要配制 1M DTT 溶液（具体地，192.8 mg DTT#7016 加 1.12 ml dH2O，确保 DTT 完全溶解）。然后，我们取出并室温预热 200

【原创】6种核酸提取方法附引用文献：动植物RNA（总、m），DNA，质粒

上, 加以改良, 具体操作如下:1> 0.1g 样品加入10%样品重多聚聚乙烯吡咯烷酮(PVPP), 液氮研磨,2> 转入离心管后加入 0.5mL 65℃预热的提取缓冲( 150mmol/L Tris , 50mmol/L EDTA , 4%SDS , 硼酸调至pH7. 5) 和 10μL 巯基乙醇, 振荡混匀后加入 20μL蛋白酶K , 37℃提取 1.5h 。3> 加 50μL 5μL mol /L KAc, 150 μL乙醇, 涡旋。4> 0. 7mL 氯仿/异戊醇(24∶1)混匀后,8000 r