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999
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麦飞生物
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现货
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文献和实验都可以保证无菌。如果试剂需要自己用干粉配制,那么在配制中需要严格按无菌操作进行。另外每次试剂配制量不宜过多,比如完全培养基建议以一到两周内用完为宜。试剂在分装时可以考虑再用针头式过滤器过滤一次,减少污染的可能性。如果所用移液器吸头是散装的,则注意在将吸头装入吸头盒时需要带手套,因为灭菌时无法完全去除吸头上可能粘附的油脂和其他杂质。 其次,安全柜每次使用前需要紫外照射30min灭菌,然后通风5min以上保证换气到位。每次处理细胞前应将实验需要的各种试剂、耗材备齐,尽量减少细胞处理过程中的来回
方法。 收获细胞(保证健康的单细胞悬液)。 使用胰蛋白酶-EDTA 溶液 ( T3924 ) 分离上述贴壁细胞。Millicell® Digital Cell Imager(MDCI10000)观察到细胞融合度应为80-90%,且状态良好。 以300 x g离心细胞悬液 5分钟并吸出上清液。将细胞重悬于少量培养物中,例如 3-5 mL 的 3dGRO™ 球状体培养基 ( S3077 ) 注:可让细胞穿过40 µM细胞过滤器或带细胞过滤器卡扣盖的5 mL 圆底聚苯乙烯试管,以实现单细胞悬浮。
,这样当然增加了污染的可能性。此外这样还会使培养皿内的液体蒸发,这对于精确定量的药物来说就显得值得注意了。所以以下二条措施是必须的a培养箱内空气必须清洁(定期紫外线照,酒精擦洗,尽量少开关培养箱)b培养箱内的湿度必须始终保持为100%(培养箱内放置无菌蒸馏水的水槽)。就好像培养皿,也是一个盖倒扣的容器,也不会污染。主要是因为盖子“L”型边缘产生气流负压的缘故,灰尘上面才附着有微生物,而气流携带的灰尘是无法通过产生负压的盖边缘的。而透气作用只是通过空气的扩散,不会产生气流,所以只会透气不会透菌。我使用24
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