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- 晶抗生物
- JK-R7195
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- 2025年07月12日
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- 供应商：
上海晶抗生物工程有限公司
- 库存：
465
- 样本：
来电咨询
- 标记物：
详见说明书
- 适应物种：
来电咨询
- 应用：
仅供科研研究使用
- 检测方法：
微量法
果糖-6-磷酸果糖激酶(PFK)/6磷酸果糖激酶/果糖6磷酸激酶测试盒_微量法
测定方法：微量法
产品规格：100管/96样
储存条件：低温保存
注 意 ：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
PFK（EC 2.7.1.11）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，负责将果糖-6-磷酸和ATP转化为果糖-1,6二磷酸和ADP，是糖酵解过程的关键调节酶之一。
测定原理：
PFK催化果糖-6-磷酸和ATP生成果糖-1,6-二磷酸和ADP，和乳酸脱氢酶进一步依次催化NADH氧化生成NAD+，在340nm下测定NADH下降速率，即可反映PFK活性。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制：
提取液：100mL×1瓶，4℃保存；
试剂一：液体20mL×1瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂×1瓶，-20℃保存；
试剂三：粉剂×1支，4℃保存；
试剂四：液体8μL×1支，4℃保存；
测定步骤：
- 分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。
- 样本测定
（2）在试剂三中加入1mL蒸馏水充分混匀，冰上放置备用；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融；
（3）在试剂四中加入1mL蒸馏水充分混匀，冰上放置待用；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻
融；
（4）在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、10μL试剂三、10μL试剂四和170μL试剂二，混匀，立即记录340nm处20s时的吸光值A1和 10min20s后的吸光值A2，计算ΔA=A1-A2。
注意：不同匀浆组织中PFK活力不一样，做正式试验之前请做1-2只预试，若ΔA>0.5，则说明活力太高，必须用提取液稀释成适当浓度匀浆上清液（计算公式中乘以相应稀释倍数），或缩短反应时间至2min或5min,使ΔA<0.5，以提高检测灵敏度。
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文献和实验剂。2，6-二磷酸果糖尽管和1，6二磷酸果糖结构相似，但F-2，6-BP不是6-磷酸果糖激酶1的产物，而是6-磷酸果糖激酶1最强烈的激活剂、最重要的调节因素。 F-2，6-BP的生成是以6-磷酸果糖为底物在6-磷酸果糖激酶2（6-phosphofructokinase2，PFK2）催化下产生。医学|教育|网搜集整理6-磷酸果糖激酶2是双功能酶，包括6-磷酸果糖激酶2与2，6-二磷酸果糖酶2活性，它们同时存在于一条55x103（55kDa）的多肽链中。6-磷酸果糖激酶2的别构激活剂是底物F-6-P，在糖
剂。2，6-二磷酸果糖尽管和1，6二磷酸果糖结构相似，但F-2，6-BP不是6-磷酸果糖激酶1的产物，而是6-磷酸果糖激酶1最强烈的激活剂、最重要的调节因素。 F-2，6-BP的生成是以6-磷酸果糖为底物在6-磷酸果糖激酶2（6-phosphofructokinase2，PFK2）催化下产生。医学|教育|网搜集整理6-磷酸果糖激酶2是双功能酶，包括6-磷酸果糖激酶2与2，6-二磷酸果糖酶2活性，它们同时存在于一条55x103（55kDa）的多肽链中。6-磷酸果糖激酶2的别构激活剂是底物F-6-P，在糖
（２）丙酮酸生成乙酰ＣＯ-Ａ （３）三羧酸循环和氧化磷酸化9 u( C _9 x6 \$ E4 d4 I ４：三羧酸循环中的４次脱氢反应生成３个ＮＡＤＨ和１个ＦＡＤＨ2 ５： 三羧酸循环中第５步反应：底物水平磷酸化是此循环中唯一生成高能磷酸键的反应: o( t2 ^& u5 v5 a5 ^2 U. r) q A+ s ６：期待有人总结5 q( a3 U! A! }7 h* j ７：整个有氧氧化需７个关键酶参与：己糖激酶、６－磷酸果糖激酶
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