亮氨酸氨基肽酶(LAP)测试盒_微量法

亮氨酸氨基肽酶(LAP)测试盒_微量法
测定方法：微量法
产品规格：100管/96样
储存条件：低温保存
注    意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：                           
LAP是一类能水解肽链N-末端为亮氨酸的酶，广泛存在于肝、肾、胰等组织中，尤其以肝脏中含量为丰富。各类肝病患者因肝细胞损伤，血清LAP的活性均有不同程度的升高，因此，血清LAP活性的检测能从不同侧面反映各种肝病的发生和发展。

测定原理：
LAP分解L-亮氨酰，在405nm有大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算LAP活性。

自备用品：
酶标仪/可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、96孔板/微量石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制：
提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存； 
试剂一：液体15mL×1瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂×1瓶，-20℃保存；




LAP测定步骤：
1、分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至405nm，蒸馏水调零。
2、将试剂二转移至试剂一中充分溶解（如较难溶解，可50℃水浴加热约30min促进溶解）；在37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）水浴10min以上；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
3、在微量石英比色皿或96孔板中加入50μL样本和150μL试剂一，混匀后立即记录405nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2，计算ΔA=A2-A1。

注意事项：若ΔA大于0.5，需将酶液用提取液稀释，计算公式中乘以相应稀释倍数。使A2-A1小于0.5，可提高检测灵敏度。