胶原酶 来源于溶组织梭菌

说明

一般描述

来自溶组织梭状芽胞杆菌的胶原酶具有胶原蛋白结合结构域（CBD）和多囊肾病样（PKD样）结构域。它还具有用于钙的Ca 2+结合位点，这对于其功能至关重要。[1]胶原酶用于治疗结缔组织疾病，Dupuytren挛缩。[2]

应用

来自溶组织梭状芽胞杆菌的胶原酶已被用于消化：

用于胰岛分离的胰腺样品[3]

用于分离肺血管平滑肌细胞（PBMC）的肺动脉样品[4]

用于分离软骨细胞的软骨样品[5]

 

该产品适用于人类肿瘤，小鼠肾脏，人类成人和胎儿的脑、肺和许多其他上皮组织的解聚。 它还被证明适用于肝脏和肾脏灌注研究、胰腺消化、非实质性大鼠肝细胞的分离、以及肝细胞制备。 胶原酶也已用于制备动脉组织，以对晚期糖基化终产物进行研究。 该酶用于（浓度约为1mg/ml）对肝细胞的释放进行检测。 消化浓度范围为0.1至5mg/mL。

生化/生理作用

每摩尔胶原蛋白酶被4g原子钙活化。 它被乙二醇-双（β-氨基乙基醚）-N，NN′,N′-四乙酸，β-巯基乙醇、谷胱甘肽、 和8-羟基 抑制。

胶原酶产品是一种由溶组织梭菌( C.histolyticum)分泌的酶的混合物，分泌酶中1 , 0-18种化合物成分的相对比例在不同产品中有所差异。 主要成分是两种胶原酶、梭菌蛋白酶和中性蛋白酶。 这些酶的协同作用可降解胶原蛋白和其他细胞内物质。胶原酶和中性蛋白酶的作用是细胞从组织有效释放所必需的。 各种类型的胶原蛋白是胶原酶的天然底物。

注意

本品在-20°C下可稳定保存一年。在37℃、50℃和-20℃下保存30天，其FALGPA或蛋白酶活性没有损失。粗制胶原酶溶液分装品（ 10 mg/mL）经快速冷冻可保持稳定，并且可在-20℃下冷冻保存。进一步冻融循环会损坏溶液。 本品在冰上放置7小时，可保留100％活性。

单位定义

一个胶原蛋白消化单元（CDU）从牛跟腱胶原蛋白中释放的肽链量和1.0 μ亮氨酸，5小时，pH7.4,37℃，在钙离子存在下的茚三酮颜色相同。一个 FALGPA水解单元每分钟，25℃，水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一个中性蛋白酶单元水解酪蛋白，产生颜色和1.0 μmole 酪氨酸每5小时，pH7.5,37℃下产生的相同。一个梭菌蛋白酶单元在DTT存在下，pH7.6,25℃，每分钟水解1.0 μmole BAEE。

制备说明

该产品从Clostridium histolyticum，XI型胶原酶中获得。它具有梭菌蛋白酶，非特异性中性蛋白酶和胰蛋白酶活性。溶液通常是在TESCA缓冲液（含有50mM TES、0.36mM氯化钙，37℃时pH 7.4）中按1-2 mg/mL进行制备。