羟自由基清除能力测试盒_微量法

羟自由基清除能力测试盒_微量法
测定方法：微量法
产品规格：100管/96样
储存条件：低温保存
注   意 ：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
羟自由基作用于体内蛋白质、核酸、脂类等生物分子，造成细胞结构和功能受损，进而导致体内代谢紊乱引起疾病。羟自由基清除能力是样品抗氧化能力的重要指标之一，在抗氧化类保健品和药品研究中得到广泛应用。

测定原理：
H2O2/ Fe2+ 通过Fenton反应产生羟自由基，将邻二氮菲- Fe2+水溶液中Fe2+氧化为Fe3+ ，导致536nm吸光度下降，样品对536nm吸光度下降速率的抑制程度，反映了样品清除羟自由基的能力。

自备实验用品：
恒温水浴锅、酶标仪、96孔板和蒸馏水。

试剂组成和配制:
提取液：液体100 mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体12mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂二：液体6mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂三：液体12 mL×1瓶，4℃保存。
试剂四：液体6mL×1瓶，4℃保存。




操作步骤：

1. 酶标仪预热30min，调节波长至536nm。
2. 工作液配制：使用之前按照每管试剂一：试剂二：试剂三=100:50:100（µL）的比例配制，用多少配多少，混匀。
3. 在EP管中加入如下试剂

   	空白管	对照管	测定管
   工作液（µL）	250	250	250
   混匀，防止局部颜色过浓
   样品（µL）			50
   试剂四（µL）		50	50
   H2O（µL）	100	50
   混匀，37℃保温60min，8000g 25℃离心5min，吸取200μL于96孔板中测定536nm处吸光值，空白管、对照管和测定管的吸光值分别记为A空、A对和A测。