6磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6-PGDH)测试盒_微量法

6磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6-PGDH)测试盒_微量法
测定方法：微量法
产品规格：100管/96样
储存条件：低温保存
注    意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
磷酸戊糖途径途径中6-磷酸葡萄糖脱氢酶（G6PDH）和6PGDH依次催化NADPH合成，与能量的平衡、生长速率和细胞活力等密切相关。此外，6PGDH逆境生理中具有重要作用。

测定原理：
6PGDH催化6-磷酸葡萄糖酸和NADP+生成NADPH，NADPH在340 nm有特征吸收峰，而NADP+没有；通过测定340nm吸光度增加速率，计算6PGDH活性。

自备仪器和用品：
低温离心机、水浴锅、可调式移液枪、酶标仪、96孔板和蒸馏水。

试剂组成和配制：
提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体19mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：粉剂×1瓶，-20℃避光保存。
试剂三：粉剂×1瓶，-20℃保存。




测定操作：
1. 酶标仪预热30min，调节波长到340 nm。
2将试剂二和试剂三转移至试剂一中充分溶解；在37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）水浴10min以上；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
3. 取96孔板，依次加入10μL样本190μL试剂一，于340nm处测定3min内吸光值变化，第10 s吸光值记为A1，第190s吸光值记为A2。△A=A2-A1
注意：空白管只需要做一次。