产品描述
姬姆萨染色液(10×Giemsa stain)
产品简介:
姬姆萨色素(又称吉姆萨色素)是由天青Ⅱ与伊红混合而成,Giemsa染色原理和结果与瑞氏染色基本相同,姬姆萨染色液对胞浆着色力较强,能较好的显示胞浆的嗜碱性程度,特别是对血液和骨髓细胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒,着色清晰,但是对胞核着色偏深,核结构显色不佳,故姬姆萨染液常与瑞氏染液联合使用。Giemsa stain以进口的姬姆萨色素、甲醇为主要原料,含特有衬染剂,经研磨配制而成,能呈现出清晰的细胞染色效果。经常用于组织切片、血液和细胞涂片、细菌、染色体显带、原生动物寄生虫等染色。嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染紫蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染淡紫色,称为中性物质。
Giemsa stain(10×)由10×储存液和10×磷酸盐缓冲液组成,1:1:8混合成工作液后使用;亦可心分开使用,即先用Giemsa stain染色液染色,再经磷酸盐缓冲液处理,亦可以得到满意的染色效果。
自备材料:
1、 载玻片
2、 蒸馏水
3、 甲醇
4、 显微镜
5、 0.1~0.5%乙酸
操作步骤(仅供参考):
(一) 一步法涂片染色
1、 Giemsa工作液的配制:
2、 按试剂(A):试剂(B):蒸馏水=1:1:8混合,即取1份Giemsa stain(10×)、1份磷酸盐缓冲液(10×)、8份蒸馏水,充分混匀,即为Giemsa工作液。Giemsa工作液为即用型试剂,不易保存,即用即配。
3、 常规方法制备血液涂片或骨髓涂片,待涂片自然干燥后,用甲醇固定1~3min。
4、 将血液涂片或骨髓涂片置于染色架上,滴加Giemsa工作液覆盖涂片,室温滴染15~30min。
5、 用自来水或蒸馏水缓慢从玻片一端冲洗。
6、 干燥、镜检。
(二) 两步法涂片染色
1、 Giemsa工作液的配制:
按试剂(A):蒸馏水=1:4配制Giemsa工作液,即取1份Giemsa stain(10×)加入到4份的蒸馏水中充分混匀,即为Giemsa工作液。Giemsa工作液为即用型试剂,不易保存,即用即配。
2、 磷酸盐工作液的配制:
按试剂(B):蒸馏水=1:4配制磷酸盐工作液,即取1份磷酸盐缓冲液(10×)加入到4份蒸馏水中充分混匀,即为磷酸盐工作液。
3、 常规方法制备血液涂片或骨髓涂片,待涂片自然干燥后,用甲醇固定1~3min。
4、 将血液涂片或骨髓涂片置于染色架上,滴加Giemsa工作液覆盖涂片,室温滴染15~30min。
5、 加入等量磷酸盐缓冲液,轻轻晃动载玻片,室温静置5~10min。
6、 用自来水或蒸馏水缓慢从玻片一端冲洗。
7、 干燥、镜检。
(三) 组织切片染色
1、 Giemsa工作液的配制:
按试剂(A):试剂(B):蒸馏水=1:1:8配制,即取1份Giemsa stain(10×)、1份磷酸盐缓冲液(10×)、8份蒸馏水,充分混匀,即为Giemsa工作液。Giemsa工作液为即用型试剂,不易保存,即用即配。
2、 新鲜组织立即置于Regaud固定液固定2天,期间应更换1次固定液。
3、 3%重铬酸jia固定1天。
4、 流水冲洗16个小时或过夜。
5、 照常规脱水、包埋。
6、 切片厚度约为5μm,常规脱蜡至水。
7、 蒸馏水清洗2次,每次1min。
8、 入含Giemsa工作液染缸,浸染18~24h。
9、 蒸馏水稍微清洗。
10、 0.1~0.5%乙酸洗1~2min。
11、 自来水稍微冲洗。
12、 用无水乙醇迅速脱水3次,每次5~10s。
13、 二甲苯透明,中性树脂封固。
注意事项:
1、 血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀,否则影响染色效果。
2、 涂片染色中Giemsa染色后,请勿先去除染液或直接对涂片用力冲洗。
3、 如果染色过深或过浅,应调整染色时间或染色液的浓度。
4、 涂片染色和组织切片染色中,pH值对染色有一定影响,载玻片应清洁、无酸碱污染,以免影响染色效果。
5、 染色液经稀释后液面应金属光泽则表示染液有染色作用,否则染色液可能失效。
6、 组织切片染色中,染色后需用大量0.1~0.5%乙酸急速冲洗,避免浮面沉淀物污染切片后难以洗脱。
7、 0.5%乙酸分化常用于Giemsa组织切片染色,如有必要亦可用于细胞涂片,但其浓度应适量下调。0.5%乙酸分化切片时,切片呈粉红色即可终止。
8、 Giemsa组织切片染色中,无水乙醇脱水要迅速,否则切片易褪色。
9、 涂片染色和组织切片染色中,如需急速获得结果,可按Giemsa stain储存液(10×):磷酸盐缓冲液=1:1配制Giemsa工作液,充分混匀,即为快速Giemsa染色工作液,将染色液滴加于细胞涂片或组织切片上,加热染色,20~30s后重新加染色液,反复5~10次,其余步骤同上。
10、 染色液可重复使用,但不宜重复多次,若有沉淀物应过滤后使用。
11、 Regaud固定液:按3%重铬酸jia:甲醛=4:1配制,临用前混匀,1~2天后失效。
12、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
产品组成
名称 |
AWH0885a 2×100ml |
AWH0885b 2×500ml |
storage |
试剂(A):Giemsa stain(10×) |
100ml |
500ml |
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试剂(B):磷酸盐缓冲液(10×) |
100ml |
500ml |
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一步法涂片染色 染色结果
嗜酸性颗粒 |
粉红色 |
嗜碱性颗粒 |
紫蓝色 |
中性颗粒 |
淡紫色 |
两步法涂片染色 染色结果