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- 晶抗生物
- 10nmol/mg pro
- JK-R6823
- 国内
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海晶抗生物工程有限公司
- 库存：
875
- 样本：
来电咨询
- 标记物：
详见说明书
- 适应物种：
来电咨询
- 应用：
仅供科研研究使用
- 检测方法：
可见分光光度法
- 检测范围：
10nmol/mg pro
线粒体柠檬酸(MCA)含量测试盒_可见分光光度法
测定方法：可见分光光度法
产品规格：25管/24样
储存条件：低温保存
注 意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
CA是线粒体三羧酸循环的个中间产物，由柠檬酸合酶催化乙酰CoA与草酰乙酸合成，其含量是三羧酸循环强度的主要指标之一。
配合测定乙酰CoA含量、柠檬酸合酶活性和CA含量，脱氢酶活性变化可以反映糖酵解进行程度，（2）综合分析乙酰CoA含量变化可以反映脂肪酸β-氧化途径提供的乙酰CoA情况，（3）乙酰CoA含量、柠檬酸合酶活性和CA含量变化可以反映三羧酸循环进行状况。
测定原理：
CA在柠檬酸裂解酶的作用下，生成α-酮酸（草酰乙酸）；在弱酸性条件下，α-酮酸进一步反应，生成相应的α-酮酸苯腙；α-酮酸苯腙在330nm处有吸收峰，该波长下吸光度的变化程度可反映出CA的含量。
自备仪器和用品：
分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、1mL石英比色皿、研钵和蒸馏水。
试剂组成和配制：
酸性提取液：液体25mL×1瓶，4℃保存。
碱性提取液：液体25mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体7.5mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体2.5mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入7.5mL蒸馏水充分溶解待用；用不完的试剂4℃保存；
标准品：液体1mL×1支，10μmol/mL柠檬酸标准液，4℃保存。
测定步骤：
1、分光光度计预热30 min以上，调节波长到330nm，蒸馏水调零。
2、试剂一、二和三37℃预热10min。
3、样本测定：
空白管和标准管通常只需要各做一个。
| 试剂名称(μL) | 空白管 | 标准管 | 测定管 |
| 试剂一 | 300 | 300 | 300 |
| 蒸馏水 | 300 | ||
| 标准液 | 300 | ||
| 样本 | 300 | ||
| 试剂二 | 100 | 100 | 100 |
| 试剂三 | 300 | 300 | 300 |
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文献和实验一、适用范围 本方法适用于测定汽油和石脑油以及铂重整原料油中微量（2～100μg/kg）铅的测定。二、方法概述试样被溴氧化成二价铅后，用稀硝酸萃取，以柠檬酸铵、氰化钾及无水亚硫酸钠为缓冲溶液，控制PH值为8-9，以双硫腙为显色剂与二价铅生成红色络合物，用氯仿萃取，以752紫外-可见分光光度计在530nm处测其吸光度，由标准曲线中查出样品吸光度对应铅的微克数，计算试样中铅含量。三、仪器及材料1、752紫外-可见分光光度计。2、3cm比色皿。3、分液漏斗250、500、1000ml。4、容量
的条件下，兰色深度与蛋白的量成正比。 folin—酚试剂法最早由lowry确定了蛋白质浓度测定的基本步骤。以后在生物化学领域得到广泛的应用。这个测定法的优点是灵敏度高，比双缩脲法灵敏得多，缺点是费时间较长，要精确控制操作时间，标准曲线也不是严格的直线形式，且专一性较差，干扰物质较多。对双缩脲反应发生干扰的离子，同样容易干扰lowry反应。而且对后者的影响还要大得多。酚类、柠檬酸、硫酸铵、tris缓冲液、甘氨酸、糖类、甘油等均有干扰作用。浓度较低的尿素（0.5%），硫酸纳（1%），硝酸纳
），使之生成磷钨蓝和磷钼蓝的混合物。这种溶液蓝色的深浅与蛋白的含量成正相关，所以可以用于蛋白质含量的测定。LoWry法除使肽链中酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸等显色外，还使双缩脲法中肽键的显色效果更强烈，其显色效果比单独使用酚试剂强3~15倍，约是双缩脲法的100倍。由于肽键显色效果增强，从而减少了因蛋白质种类不同引起的偏差。LoWry法适于微量蛋白的测定，对多个样品同时测定较为方便。但对不溶性蛋白和膜结合蛋白必须进行预处理（如加入少量的SDS）。 1. 双缩脲法的原理双缩脲
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