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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海晶抗生物工程有限公司
- 库存:
895
- 样本:
来电咨询
- 标记物:
详见说明书
- 适应物种:
来电咨询
- 应用:
仅供科研研究使用
- 检测方法:
可见分光光度法
- 检测范围:
10nmol/mL
ATP含量测试盒_可见分光光度法
测定方法:可见分光光度法
产品规格:50管/24样
储存条件:低温保存
注 意 :正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
ATP广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是生物能量通货,能荷是描述细胞能量代谢状态的主要参数。测定ATP含量并且计算能荷,能够反映能量代谢状态。
测定原理:
肌酸激酶催化肌酸和ATP反应生成磷酸肌酸,可在700nm下用磷钼酸比色法检测磷酸肌酸含量,以此反应ATP含量。
自备仪器和用品:
分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、1mL石英比色皿、研钵和蒸馏水。
试剂组成和配制:
酸性提取液:液体60mL×1瓶,4℃保存;
碱性提取液:液体60mL×1瓶,4℃保存;
试剂一:粉剂×1支,4℃保存;临用前加入2mL蒸馏水充分溶解待用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂二:液体3mL×1瓶,4℃保存;
试剂三:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入300μL蒸馏水充分溶解待用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂四:液体10mL×1瓶,4℃保存;
试剂五:液体50mL×1瓶,4℃保存;
标准液:液体10mL×1瓶,1μmol/mLATP标准液,4℃保存;
测定步骤:
1、分光光度计预热30 min以上,调节波长到700nm,蒸馏水调零。
2、显色剂的配制:临用前请根据拟用显色剂体积(样本数×0.87m L),按试剂四(mL):试剂五(mL)=1:5的比例配制。用多少配多少。
3、样本测定:
| 试剂名称(μL) | 测定管 | 对照管 | 标准管 | 空白管 |
| 样本 | 30 | 30 | ||
| 标准液 | 30 | 30 | ||
| 试剂一 | 60 | 60 | ||
| 试剂二 | 30 | 30 | 30 | 30 |
| 试剂三 | 10 | 10 | ||
| 蒸馏水 | 70 | 70 |
| 显色剂 | 870 | 870 | 870 | 870 |
注意:空白管和标准管通常只需要各做一个。每个测定管设一个对照管。
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文献和实验(7)式或(9)式可计算叶绿素总量。 叶绿体色素的提取液中除含有叶绿素a与b外,还含有叶黄素和胡萝卜素,因为叶黄素和胡萝卜素的吸收光谱均在蓝光区,故不会干扰叶绿素含量在红光区的分光光度法测定。 器材与试剂 722分光光度计,叶绿体色素提取所需器材。 方法与步骤 1. 提取叶绿素。 2. 测定光密度。 在1cm比色杯中,注入叶绿素提取液(浓度大时需稀释)。另以叶绿素提取介质作为参比溶液注入同样的比色杯中。根据实验要求,选用相应的波长(测总量选用652nm,测叶绿素a、b含量
吸收峰。据此所测得的吸光度值代人不同的经验公式(见结果计算),计算出叶绿体色素丙酮(或乙醇)提取液中叶绿素 a 和 b 的浓度及其叶绿素总浓度和类胡萝卜素的总浓度,并依据所使用的单位植物组织(鲜重、干重或面积),求算出色素的含量。 [ 实验目的 ] 掌握分光光度法对植物叶绿体色素提取液中叶绿素 a 和 b 的浓度及其叶绿素总浓度和类胡萝卜素的总浓度测定与计算方法,以及植物材料中各种色素含量的求算方法。 [ 器材和试剂 ] 1 .植物材料 新鲜(或烘干)植物叶片,如菠菜叶片等。 2 .实验
、45.6为叶绿素a、b在波长645nm时的比吸收系数。解方程式(1)(2),则得:此时,CT为总叶绿素浓度,CA 、CB为叶绿素a、b的浓度,单位为每升毫克,利用上面(3)(4)(5)式,即可以计算a、b总叶绿素的浓度。二、仪器药品 扭力天平 剪刀 研钵 移液管 漏斗 大试管 丙酮 碳酸钙 石英砂 721型分光光度计(如有其他精密型号的分光光度计则更好)三、实验步骤 1、提取叶绿素从植株上选取有代表性的叶片数张,于扭力天平上称取0.1g鲜重,剪碎后置于研钵中,加蒸馏水5-6ml,碳酸钙少许及适量
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