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- 晶抗生物
- JK-R6728
- 国内
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海晶抗生物工程有限公司
- 库存：
970
- 样本：
来电咨询
- 标记物：
详见说明书
- 适应物种：
来电咨询
- 应用：
仅供科研研究使用
- 检测方法：
可见分光光度法
还原型抗坏血酸(AsA)/维生素C含量测试盒_可见分光光度法
测定方法：可见分光光度法
产品规格：50管/48样
储存条件：低温保存
注 意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
AsA又称维生素c。AsA是辅酶、自由基清除剂、电子共体/受体和草酸盐与酒石酸盐生物合成的底物等。作为植物细胞中重要的抗氧化剂，AsA在保护叶绿体免于氧化损伤起着举足轻重的作用，也是衡量农作物产品品质的重要指标之一。
测定原理：
在乙酸溶液中，抗坏血酸与固蓝盐B反应生成的草酰肼–2–羟基丁酰内酯衍生物，在大吸收波长420处测定吸光度。
自备仪器和用品：
研钵、冰、低温离心机、紫外分光光度计、1mL玻璃比色皿、可调式移液器和蒸馏水。
试剂组成和配制：
提取液：液体60mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体4mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体6mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：粉剂×2瓶（棕色），4℃避光保存。临用前配制，每瓶加入7 mL蒸馏水充分溶解，用不完的试剂4℃下可保存3天。
- 组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆。8000g，4℃离心20min，取上清置冰上待测。
3. 血清等液体：直接测定。
AsA测定操作：
1. 分光光度计预热30 min，调节波长到420 nm，蒸馏水调零。
2. 在EP管中加入下列试剂
| 试剂名称（µL） | 测定管 | 空白管 |
| 样本 | 200 | |
| 提取液 | 200 | |
| 试剂一 | 60 | 60 |
| 试剂二 | 100 | 100 |
| 试剂三 | 240 | 240 |
| 水 | 1400 | 1400 |
白。
注意：空白管只需测定一次。
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文献和实验一、原理AsA-POD催化AsA与H2O2反应，使AsA氧化成单脱氢抗坏血酸（MDAsA）。随着AsA被氧化，溶液中290nm波长下的消光值（A290）下降，根据单位时间内A290减少值，计算AsA-POD活性。AsA氧化量按消光系数2.8（mmol/L）/cm计算，酶活性可用每克鲜重每小时氧化AsA的微摩尔数μMol/g·H表示。二、仪器离心机；紫外分光光度计；研钵；试管。三、试剂50mmol/L K2PO4－KH2PO4缓冲液（PH7.0，内含0.1mmol/L EDTA-Na2）
实验原理 AsA-POD催化AsA与H2O2反应，使AsA氧化成单脱氢抗坏血酸（MDAsA）。随着AsA被氧化，溶液中290nm波长下的消光度值（A290）下降，根据单位时间内A290减少值，计算AsA-POD活性。AsA氧化量按消光系数2.8(mmol/L)/cm计算，酶活性可用μmolAsA/(g FW•h)表示。 实验试剂 50mmol/L K2HPO4-KH2PO4缓冲液（pH7.0，内含0.1mmol/L
一、原理还原型抗坏血酸（AsA）可以把铁离子还原成亚铁离子，亚铁离子与红菲咯啉（4,7-二苯基-1,10-菲咯啉，BP）反应形成红色螯合物。在534nM波长的吸收值与AsA含量正相关，故可用比色法测定。脱氧抗坏血酸（DAsA）可由二硫苏糖醇（DTT）还原成AsA。测定AsA总量，从中减去还原型AsA，即为DAsA含量。二、仪器与用具离心机；分光光度计；研钵；试管。三、试剂5%三氯乙酸（TCA）；20%TCA；无水乙醇溶液；0.4%磷酸－乙醇溶液；0.5%BP－乙醇溶液；0.03%FeCl3－
技术资料
