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细胞划痕实验
华丘生物
细胞划痕实验/细胞功能检测
4个时间点
(1) 先用marker笔在6孔板背后,用直尺比着,均匀得划横线,大约每隔0.5-1cm一道,横穿过孔。每孔至少穿过5条线。
(2) 将细胞进行常规培养、换液,待细胞融合至70%~80%时,将细胞接种于6孔板中,接种16h后,给予不同浓度的药物刺激细胞,待细胞融合至100%时予进行实验;
(2) 用10μl无菌微量移液枪头在细胞板上划痕,用枪头比着直尺,尽量垂至于背后的横线划痕,枪头要垂直,不能倾斜,PBS液冲洗2-3次以去除被刮下的细胞,加入1%血清培养基。
(3) 于37℃,5%CO2、无血清培养基、不同浓度条件下培养箱中继续培养,分别于划痕后0,6,24,32, 48小时取样,拍照。
(4)用显微镜自带测量软件测量各组细胞相同时间点任意3个部位划痕面积,计算细胞迁移距离迁移率=(0h-其他时间点)/0h,以反映各组细胞运动迁移能力,数据统计。2.2 结果分析
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