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文献和实验相关专题 之前已将讲述了如何选择合适的 细胞培养 板,这次就说下细胞培养中常用第二个工具——细胞培养瓶。细胞培养瓶按照底部的形状可以分为方形的、三角形等,下面来看下各种形状的细胞培养瓶吧。 细胞培养 瓶,顾名思义就是用来培养细胞的。根据材质可以分为玻璃的和塑料的,底部形状有正方形、长方形、三角形等,根据瓶子容积有5至500ml供选择。另外,表面经过特殊
一. 细胞复苏与培养 将液氮或- 80℃ 保存的肿瘤细胞于 37℃ 水浴,快速溶化,用 8.0ml 培养基混匀已融化的肿瘤细胞悬液,于 1500 转/ 分,离心 3 分钟。 弃上清,再吸取 8.0ml 培养基质混匀细胞沉淀,再 1500 转/ 分,离心 3 分钟,弃上清,细胞沉淀用 1.0ml 培养基混匀,备用。 另取一个 75cm2 方瓶,加入 14.0ml 培养基质,将上述制备的含 肿瘤细胞悬液(1.0ml)加入此方瓶中,于 37℃,5%CO2 孵育箱中培养。 若此肿瘤
,种植于75cm 2 培养瓶,经1小时差速黏附去除成纤维细胞后,将细胞悬液转移到一新的75cm2培养瓶继续培养,两天换液一次。 7天后将培养瓶放入水平摇床,260rpms 2小时 37℃,换液弃除小胶质细胞,放入培养箱平衡1小时,重新置于水平摇床,260rpms 18小时37℃,换液弃除少突胶质细胞,用新鲜培养基洗2遍,加入0.25%胰蛋白酶与0.02% EDTA1:1混合液消化、传代备用。
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