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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
999
- 英文名:
SDS-PAGE蛋白加样缓冲液(5x,含DTT)
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海酶联生物科技有限公司
- 保存条件:
避光低温保存
- 规格:
1ml/5x1ml/10ml
| 规格: | 1ml | 产品价格: | ¥68.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 5x1ml | 产品价格: | ¥105.0 |
| 规格: | 10ml | 产品价格: | ¥130.0 |
SDS-PAGE蛋白加样缓冲液(5×,含DTT)
产品简介:
蛋白上样缓冲液主要由TRIS、SDS、溴酚蓝、还原剂等组成。SDS 可与蛋白质结合使蛋白质-SDS 复合物上带有大量的负电荷,这使蛋白质本身的电荷完全被 SDS 掩盖,消除了各种蛋白质本身电荷的差异;SDS 还可以断开分子内和分子间的氢键,破坏蛋白质分子的二级结构和三级结构。还原剂可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键,破坏蛋白质结构,消除了蛋白结构之间的差异,终无电荷及结构上差异的蛋白(亚单位),电泳速度只是与其分子量大小有关。溴酚蓝作为电泳指示剂,可大概指示电泳结束的时间。
SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5×,含DTT)即SDS-PAGE Sample Loading Buffer(5×,with DTT),是一种经过改良的以溴酚蓝为染料的5倍浓缩的蛋白上样缓冲液。
本产品含少量DTT,但不含有毒物质β-巯基乙醇,使蛋白上样操作相对安全健康。
以上产品由上海酶联生物提供,包括产品说明书,本司还供应ELISA试剂盒产品、实验原理、操作步骤等产品详细介绍。
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文献和实验与蛋白充分结合.其实加热不是问题的关键,比如上述的Reynolds等人制备SDS-protein样品的方法是用先用盐酸胍处理,以得到蛋白多肽的无规卷曲构象(random coil conformation)然后用含SDS与巯基乙醇的缓冲液进行透析,文中还指出,若是省去盐酸胍这一处理步骤,直接将蛋白用含SDS与巯基乙醇的缓冲液进行透析能得到一样的结合率(约1.4g/1g),同样在Reynolds的另一篇文献中(THE JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY,1970,245
大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶E292对于氨基酰化活性的作用
-LB液体培养基,37o C,300 rpm振荡培养转化子至对数生长期。 2) 用0.5 mM IPTG诱导6小时,取出20ul培养液,加入等体积的SDS-PAGE上样缓冲液,100o C煮沸10分钟,离心取上清液进行SDS-PAGE检查转化子中各变种酶基因的表达情况。 3) 将高表达转化子5 mL菌液转接至500 mL氨苄- LB液体培养基中37 o C,300 rpm培养至对数生长期,用0.5 mM IPTG诱导8小时,收集菌体。
SDS 胶垂直拖尾的可能原因解决办法水平 SDS-PAGE:浓缩胶长度太短有效的浓缩胶长度>25mm蛋白没有被 SDS 充分包裹平衡缓冲液 SDS 浓度>1%,平衡 2 x 15分钟糖蛋白用硼酸缓冲液代替 Tris 缓冲液用宽范围小孔梯度胶蛋白去糖基化部分自由的巯基再次氧化生成二硫键聚合物衡缓冲液中加入充足的 DTT,使蛋白烷基化用 tributylphosphine 代替DTT和碘乙酰胺蛋白发生氨甲酰化含有尿素的溶液加热温度不能超过 37℃使用前,尿素去离子化(deionize urea











