乳腺炎革兰氏阳性菌显色培养基（含增补剂）

细胞增殖和细胞毒性（CCK-8法）原理和经验总结

相比线性范围更宽，灵敏度更高； CCK-8细胞活性检测试剂无需预制，即开即用。 四、实验操作指南 1．96孔板每孔加入细胞100 μL（留2个空白组不加细胞，加入同体积的培养基）。细胞置于37°C的5%CO2细胞培养箱中培养24 h。 注：A、通常细胞增殖实验每孔加入100 μL约含2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100 μL约含5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。 B、培养温度与细胞类型有关，一般哺乳动物细胞建议37°C

标准菌株验证鉴定步骤

化钠溶液中，接种于硫乙醇酸盐流体培养基中，30℃～35℃ 培养18-24 小时；或在厌氧条件下接种于哥伦比亚琼脂上，30℃～35℃ 厌氧培养18-24 小时。   2、菌种鉴定： 2.1 金黄色葡萄球菌：    革兰氏染色试验：革兰氏阳性菌(紫色)，葡萄状排列，球菌。    兔血浆试验：接种1 个单菌落于1 支兔血浆溶液中，30℃-35℃ 培养至6 小时，每半小时观察一次。凝固为阳性。金黄色葡萄球菌为阳性反应。   2.2 大肠埃希氏菌：   革兰氏染色试验：革兰氏阴性杆菌，红色。  

Western 实验步骤

样本准备 蛋白提取 所需仪器：匀浆器、RIPA 裂解液、PMSF（蛋白酶抑制剂）、磷酸酶抑制剂、剪刀、镊子，消毒酒精棉、PBS、移液器、离心机。 裂解液配制——RIPA 裂解液：PMSF=100：1。 1） 组织处理：首先用酒精棉消毒剪刀和镊子，取适量的组织于匀浆器中，用剪刀剪碎加适量的裂解液冰水中匀浆 1-4 min。匀浆结束后吸取溶液于 EP 管中保存备用。（含血液较多的组织可先用 PBS 清洗后再匀浆） 2） 细胞处理： A、 贴壁细胞处理：去掉培养基用 PBS 清洗后加入适量的裂解