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Sarstedt
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文献和实验利用离子交换的原理，在低盐情况下使DNA 吸附在带正电荷的滤膜上，再利用含有高浓度盐类的缓冲液将DNA 自膜上溶离下来。 仪器用具：Mupid II 迷你电泳槽；UV transilluminator;防护面罩；扁平药匙；干净刀片；65℃水浴或恒温槽 药品试剂： 经BamHI 及HindIII 作用的pBlueGus 及pQE31 含EtBr 的1.0 % 12-well agarose gel 1×NET （20 mM Tris-HCl; 150 mM NaCl; 0.1 mM
, pH 5.0），混合均匀后，再检查溶液的颜色。◆ 胶体溶液的pH 值必须≦7.5,若大于7.5,会造成DNA 与silica-gelmembrane 间的吸附效率骤降。此组套的Buffer QG 中含有pH 指示剂，若pH≦7.5,溶液颜色应呈黄色。7） 将spin column 置于2 mL 收集管中，加入上述完全溶解的胶体溶液，以12,000rpm 离心1 min.◆ 每个QIAquick spin column 只能装约0.8 mL 溶液，所以请分多次离心，每次离心完需将下方收集管内的收集液
. 质粒拷贝数低： 由于使用低拷贝数载体引起的质粒 DNA 提取量低，可更换具有相同功能的高拷贝数载体。 11. 菌体中无质粒： 有些质粒本身不能在某些菌种中稳定存在，经多次转接后有可能造成质粒丢失。例如，柯斯质粒在大肠杆菌中长期保存不稳定，因此不要频繁转接，每次接种时应接种单菌落。另外，检查筛选用抗生素使用浓度是否正确。 12. 碱裂解不充分： 使用过多菌体培养液，会导致菌体裂解不充分，可减少菌体用量或增加(以天根生化的质粒小提试剂盒中的溶剂配置为例)溶液 P1、P2 和 P3 的用量
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