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- 进口/国产
- 2025年07月09日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
490 HIV Protease Assay Kit *Fluorimetric*
- CAS号：
490 HIV Protease Assay Kit *Fluorimetric*
- 保质期：
详见说明
- 供应商：
齐源生物
- 保存条件：
-20°C
- 规格：
1 kit
HIV 蛋白酶 (PR) 被确定为用于设计选择性获得性免疫缺陷综合征 (AIDS) 疗法的重要药物筛选目标。490 HIV 蛋白酶检测试剂盒使用优化的 FRET 肽底物来连续测量 HIV 蛋白酶活性。这种基于 FRET 的荧光底物源自 HIV-1 PR 的天然加工位点。用这种底物孵育重组 HIV-1 PR 会导致特异性切割和荧光强度的时间依赖性增加，这与底物水解的程度呈线性关系。由于其在确定动力学分析所需的反应速率方面的简单性和精确性，该试剂盒比常用的 HPLC 或基于电泳的逆转录病毒 PR 水解肽底物的测定具有许多优势。
HIV-1 protease diluent: Dilute HIV protease to an appropriate concentration in assay
buffer. The recommended volume for HIV-1 protease diluent is 40uL/well. You may
adjust the volume according to your preference.
Note: Prepare enzyme diluent immediately before use. Avoid vortexing enzyme. Prolonged storage of
diluted enzyme or vigorously vortexing will denature the enzyme. Keep enzyme on ice.
Test compound: Dilute test compounds with deionized water or an appropriate vehicle.
The recommended volume for the diluted test compound is 10uL/assay. You may
adjust the volume according to your preference.
Pepstatin A4(control inhibitor): Add 20uL of DMSO (Component F) into one vial of
Pepstatin A (Component C) to get a concentration of 2 mM. Dissolve it completely by
vortexing. Dilute 2 mM Pepstatin A to 2uM in assay buffer. Prepare 10uL per well of
2uM pepstatin A.
Note: 2 mM Pepstatin A should be stored at -20℃ for future use. 2uM Pepstatin A is not stable, and should be prepared fresh for each experiment.
Add test compounds and HIV-1 protease diluent into microplate. The suggested total
volume of HIV-1 protease diluent plus test compound is 50uL, for example 40uL of protease diluent and 10uL of test compound. You may adjust the volume according to your preference.
Set up the following controls at the same time:
Positive control contains HIV-1 protease diluent without test compound
Inhibitor control contains HIV-1 protease diluent and known inhibitor, pepstatin A (10uL/well).
Vehicle control contains HIV-1 protease diluent and vehicle used to deliver test compound (e.g. DMSO).
Test compound control contains assay buffer and test compound. Some test compounds have strong autofluorescence and may give false results.
Substrate control contains assay buffer
Using the assay buffer (Component D), bring the total volume of all controls to 50uL.
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文献和实验-1的0组尚不能定量检测其病毒RNA.因此，提高现有检测试剂盒检测各亚型的敏感性和研制能定量检测HIV-2型和HIV-1型中的O组病毒的试剂盒应是当务之急。 HIV亚型与抗病毒治疗 由于HIV的高度变异性和HIV在体内高频率复制，在感染者体内每天可以产生数以亿计的不尽相同的子代病毒，有研究表明，在用同一药物或几种药物顺序治疗时均会在数周内产生抗一或抗几种药物的赖药株，赖药株甚至可以出现在未用药物治疗的病例中，当药物治疗开始时，这些赖药株便代替原先对药物的敏感株而成为优势株，同时，赖药株还可随
HIV检测试剂盒出售，但由于设备及试剂均很昂贵，限制了它的广泛应用. 对体内的病毒水平作准确的定量分析，有助于对感染过程的各期作病因性分析，观察药物的疗效，更好地指导治疗.Bagnarelli用QC-PCR法检测33例HIV感染者外周血标本中病毒的拷贝数及转录情况，结果提示，病毒拷贝数与疾病进展和CD4+淋巴细胞计数减少之间存在着与高度相关性，在疾病的各个阶段均存在着HIV-1结构基因的特异性转录和复制.有趣的是，尽管随着疾病的进展，病毒血症不断加重，但AIDS患者的个别感染细胞的转录
在扩增引物的5'端，这种连接稳定了信号双链体，并建立了荧光能量转换反应，因为稳定结合在一起的双链体接受光后会发生能量转换.当以后的循环开始后，新生链开始产生。引起这种结合的引物双链体变为单链，接受光的能力下降，发生能量转换的全部瓦解.荧光信号随着循环次数的减少而被测量出来，以计算特定扩增片段的不断累积量.目前国内已有这种HIV检测试剂盒出售，但由于设备及试剂均很昂贵，限制了它的广泛应用. 对体内的病毒水平作准确的定量分析，有助于对感染过程的各期作病因性分析，观察
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