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文献和实验huaxiflame05 各位,我的实验最近遇到了问题,检测一个趋化因子,Western 重复性很差,只有蛋白上样量接近200ug的时候才能勉勉强强看到很弱的条带,并且杂带很多。师兄建议让公司合成纯化蛋白。但问题是原核表达的蛋白分子量35kDa,在真核系统里,这个蛋白质高度糖基化,分子量可达到60kD。在这种情况下,如何构建阳性对照呢? ***解答 magichunter 换成单克隆抗体应该特异性更好
,从而将目的基因靶向性地导入肿瘤细胞。Khare等将抗人癌胚抗原(CEA)单链抗体编码基因与env基因重组,使反转录病毒将“自杀基因”――一氧化氮合成酶(NOS)靶向导人CEA阳性的肿瘤细胞,并通过过度合成NOS杀死肿瘤细胞。 靶向转移目的基因策略的工作原理 另一个例子是腺病毒。腺病毒载体在感染靶细胞时,首先依靠通过病毒衣壳(capsid)上的纤维蛋白(nber)头部的knob结构域识别并结合靶细胞表面的“柯萨奇病毒和腺病毒受体”(CAR),然后通过衣壳的五邻体
Mouse IgG2а,那么优先选择相同荧光标记的Mouse IgG2b作为同型对照。如果最后还是没有找到Mouse IgG2b,那么选者相同荧光标记的Mouse IgG2作为同型对照。 3、哪些客户需要使用同型对照? A 对流式不是非常熟悉的客户。 B 做胞内流式客户,比如胞内细胞因子、趋化因子和信号蛋白等。 C 使用不常见的标志或者特异性不高的标志的客户,因为客户不熟悉不常见标志的表达情况,根据同型对照可以判断阳性细胞的位置。一些特异性不高
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