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文献和实验System(表位标签系统)最重要的是要有高亲和性和高特异性的单克隆抗体和有能够识别的标记(肽)组合。在PA Tag System中有大鼠IgG2a单克隆抗体NZ-1和PA tag(GVAMPGAEDDVV)。但原本NZ-1并不用于亲和标签系统。和现在常用的HA标签系统、Myc标签系统一样,NZ-1本来是为了检测出目的蛋白而使用的抗体(FLAG标签系统是例外,它已经开发出用于亲和标签系统的抗体)2,3,4,5)。而NZ-1原来的标记蛋白是人的平足蛋白,是与血小板凝集相关的单次跨膜型糖蛋白,在恶性肿瘤细胞中会大量
性免疫球蛋白产生交叉反应, 例如:检测小鼠样本蛋白,则不应选择小鼠或大鼠源的一抗,最好选兔源的一抗,则二抗则可选择偶联了检测分子(酶、荧光素、生物素等)的抗兔IgG。如果选择有偶联物的一抗则不适用上述情况,除免疫组化外的其它对不含内源性免疫球蛋白样本的检测方法,则抗体宿主物种的影响不大,如对不含IgG 的细胞裂解物样本的western blotting检测。 尽管如此,含有血清的组织裂解物和组织培养上清中含有免疫球蛋白,还原变性样本中含IgG,在western blot 检测中则结合
可);如果一抗是从兔血清里制备的兔源多克隆抗体,则相应的二抗需要选择抗兔的二抗。即根据一抗的物种来源选择相应的抗该物种的二抗。艾美捷能为您提供最全的抗不同种属的原装进口二抗,包括抗小鼠、大鼠、兔、山羊、绵羊、人、豚鼠、猪、马、牛、鸡、鸭等二抗。【一抗的类别亚型】二抗需与一抗的类别或亚类相匹配。这通常是针对单克隆抗体而言。多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白,因此相应的二抗就是抗IgG抗体。其中单克隆抗体的类别及亚类通常会在产品说明书中都会有描述,如果你的一抗是小鼠IgM,那么相应的二抗就应当是抗小鼠IgM
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