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一般描述
我们致力于为您提供更环保的替代产品,以符合“绿色化学的12项原则”的一项或多项原则要求。本品符合安全化学品原则。 DIG系统是灵敏且具有成本效益的方案,可替代核酸放射性标记和检测。有许多已发表论文证明了DIG系统的通用性,因此使用放射性标记不再是标记用于杂交的DNA的唯一选择。PCR DIG标记MixPLUS是脱氧腺苷三磷酸(dATP)、脱氧胞嘧啶三磷酸(dCTP)、脱氧鸟苷三磷酸(dGTP)、脱氧尿苷三磷酸(dUTP)和洋地黄毒苷(DIG)-11-dUTP的锂盐混合物。该核苷酸混合物可以直接添加到聚合酶链反应(PCR)中,并将DIG标记的核苷酸掺入PCR产物中。掺入dUTP(代替脱氧胸苷三磷酸(dTTP))可以降解先前与尿嘧啶-DNA糖基化酶(UNG)进行的扩增反应中污染的PCR产物,从而防止残留污染。掺入的DIG标记可使PCR产物与抗DIG偶联物的检测更加灵敏,例如在PCR ELISA,DIG标记和PCR ELISA,DIG检测中。PCR DIG标记MixPLUS可提供与PCR DIG标记混合物相当的信号强度。
应用
PCR DIG标记MixPLUS用于在聚合酶链反应(PCR)中用洋地黄毒苷(DIG)-脱氧尿苷三磷酸(dUTP)直接标记扩增产物并防止残留。PCR DIG标记Mixplus浓缩10倍。对于每个反应,向反应混合物中加入最终体积的10%。质量
对PCR DIG标记MixPLUS进行功能测试。其他说明
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文献和实验【交流】DIG/Biotin标记的Southern/Northern杂交专题讨论
Southern印迹杂交(Southern blot)是1975年由英国人southern创建,是研究DNA图谱的基本技术,在遗传病诊断、DNA图谱分析及PCR产物分析等方面有重要价值。 早期的Southern印迹是将凝胶中的DNA变性后,经毛细管的虹吸作用,转移到硝酸纤维膜上。印迹方法如电转法、真空转移法;滤膜发展了尼龙膜、化学活化膜(如APT、ABM纤维素膜)等。利用Southern印迹法可进行克隆基因的酶切、图谱分析、基因组中某一基因的定性及定量分析、基因突变分析及限制性片断长度多态
I采用了显色法,使用显色底物 NBT/BCIP;而Starter Kit II选用化学发光法底物CSPD。 如果您用来合成探针的DNA模板的量比较少或是质量不够高的时候,建议您使用PCR DIG Probe Synthesis Kit。该试剂盒专用于制备高灵敏度的杂交探针,例如单拷贝的基因。其另一个特点就是实验中无需定量斑点检测过程,通过定量凝胶电泳就可以快速确定PCR标记探针的效率。
/μl的浓度重悬于DEPC-H2O中,取10μl电泳检测线性化质量,其余于-20℃下保存备用。 五、RNA探针制备(根据the DIG system user's guide) A. 地高辛标记的体外转录 试剂及其配制(试剂盒提供): 10× NTP标记混合物:in Tris-HCl (pH 7.5) 10mmol ATP 10mmol CTP 10mmol GTP 6.5mmol
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