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- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
一年
- 英文名:
/
- 库存:
10~100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
25T/50T
| 规格: | 25T | 产品价格: | ¥2000.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50T | 产品价格: | ¥5000.0 |
温州科淼生物科技有限公司(Whenzhou KeMiao Biological Technology Co.,Ltd)是一家专业从事“产品研发生产,市场销售,技术服务”为一体的高科技生物技术公司,致力于为科研实验服务,主要产品为试剂盒、抗体、蛋白、相关溶液等其他相关试剂。

PCR技术定义
聚合酶链反应技术(Polymerase chain raction ,PCR)是一种在体外扩增特定DNA片段的方法,具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点,可用很短时间使目的基因或某一片段扩增十万乃至几百万倍。
检测原理
PCR(Polymerase chain raction ),又称聚合酶链反应技术,是一种类似于DNA的 天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:
①模板DNA的变性:模板DNA经加 热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;
②模板DNA与引 物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;
③引物的延伸:DNA模板--引物结合 物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程,就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需 2~4分钟,2~3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。到达平台期(Plateau)所需循环次数取决于样品中模板的拷贝。
试剂盒组成
| 名称 | 50T配置 | 保存 |
|---|---|---|
| 2×Probe qPCR MagicMix | 500μL | -20℃ |
| 荧光 PCR 专用模板稀释液 | 1mL | -20℃ |
| 探针法 qPCR 引物-探针混合液 | 150μL | -20℃ |
| qPCR 阳性 对照(1×10E7 拷贝/μL) | 50μL | -20℃ |
| 说明书 | 50μL | / |
试验所需自备物品
样品DNA或RNA

操作步骤
1.稀释阳性对照制备标准曲线样品
2.制备样品DNA或RNA(可以用自选方法纯化样品的DNA或RNA,也可以咨询客服推荐)
3按照说明书制备Probe qPCR反应。
PCR程序(三步法)
第一步:94℃变性30s;
第二步(循环30-35次):94℃变性30s,55-60℃退火30s,72℃延伸24s(时间按照合成速度和长度来计算);
第三步:72℃终止延伸5-10min。
PCR试剂盒特点
1.操作简单,即开即用,用户只需提供样品模板;
2.专一性好,特异性强;
3.提供阳性对照,便于区分假阴性样品;
4.一管式闭管操作,降低了交叉污染;
备注:1.本公司提供各类指标的PRC试剂盒,包括染料法和探针法,另提供相关试剂。
2.需详细说明书请联系客服。
联系方式如下:
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联系电话:13997448220(同微信) QQ:1750215841
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文献和实验【公告】丁香通试用中心:10月免费试用装精选(10月18日有更新)
。 2. 鼠尾直接PCR试剂盒(常温裂解):一步法 PCR;处理鼠尾样本无需加热;用于高通量鉴定、筛选。 3. 通用植物直接PCR试剂盒:无需进行 DNA 纯化;高效特异性扩增样品;用于多种植物叶片的处理。 4.EDTA抗凝血直接PCR试剂盒:无需预处理血液;世界上血液耐受能力最强的 PCR 反应体系;安全可靠。 5.植物总RNA提取试剂盒:整套试剂盒RNase-Free;RNA得率高;质量高;安全快速。 有奖免费试用: RIPA裂解液(中) 火晶梯度PCR仪 康宁SORENSON
-A尾巴的RNA分子加上一串A尾巴,然后用带有一段通用序列(universal tag)的Oligo-dT及RT酶来合成cDNA。这样设计的一个好处就是一次RT反应合成了所有miRNA分子以及其他小RNA、mRNA对应的cDNA,接下来想用来检测什么都可以,细细算来省了不少特异引物和多次RT反应的钱呢!整个RT反应操作也是非常简单,加入预先混好的酶,37℃孵育60min,95℃孵育5min即完成cDNA合成。 最后一步就是取出一点cDNA为扩增模板,加入正反引物和real-time PCR 试剂盒
状态下,SYBR Green I发出微弱的荧光,但一旦与双链DNA结合,其荧光增加1000倍。所以,一个反应发出的全部荧光信号与出线的双链DNA量呈比列,且会随扩增产物的增加而增加。 SYBR Green I荧光染料与DNA双链的结合双链DNA结合染料的优点:实验设计简单,仅需要2个引物,不需要设计探针,无需设计多个探针即可以快速检验多个基因,且能够进行熔点曲线分析,检验扩增反应的特异性,低的初始成本,通用性好,因此国内外在科研中使用比较普遍。荧光探针法(Taqman 技术):PCR
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