- ￥2000 - 5000
- KEMOBio
- 进口/国产
- KM0300753
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
一年
- 英文名：
/
- 库存：
10~100
- 供应商：
科淼生物
- 规格：
25T/50T
| 规格： | 25T | 产品价格： | ￥2000.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 50T | 产品价格： | ￥5000.0 |
温州科淼生物科技有限公司(Whenzhou KeMiao Biological Technology Co.,Ltd)是一家专业从事“产品研发生产，市场销售，技术服务”为一体的高科技生物技术公司，致力于为科研实验服务，主要产品为试剂盒、抗体、蛋白、相关溶液等其他相关试剂。
PCR技术定义
聚合酶链反应技术（Polymerase chain raction ,PCR）是一种在体外扩增特定DNA片段的方法，具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点，可用很短时间使目的基因或某一片段扩增十万乃至几百万倍。
检测原理
PCR（Polymerase chain raction ），又称聚合酶链反应技术，是一种类似于DNA的 天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：
①模板DNA的变性：模板DNA经加 热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；
②模板DNA与引 物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；
③引物的延伸：DNA模板--引物结合 物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需 2～4分钟，2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。到达平台期(Plateau)所需循环次数取决于样品中模板的拷贝。
试剂盒组成
| 名称 | 50T配置 | 保存 |
|---|---|---|
| 2×Probe qPCR MagicMix | 500μL | -20℃ |
| 荧光 PCR 专用模板稀释液 | 1mL | -20℃ |
| 探针法 qPCR 引物-探针混合液 | 150μL | -20℃ |
| qPCR 阳性 对照(1×10E7 拷贝/μL) | 50μL | -20℃ |
| 说明书 | 50μL | / |
试验所需自备物品
样品DNA或RNA
操作步骤
1.稀释阳性对照制备标准曲线样品
2.制备样品DNA或RNA(可以用自选方法纯化样品的DNA或RNA，也可以咨询客服推荐)
3按照说明书制备Probe qPCR反应。
PCR程序（三步法）
第一步：94℃变性30s；
第二步（循环30-35次）：94℃变性30s，55-60℃退火30s，72℃延伸24s（时间按照合成速度和长度来计算）；
第三步：72℃终止延伸5-10min。
PCR试剂盒特点
1.操作简单，即开即用，用户只需提供样品模板；
2.专一性好，特异性强；
3.提供阳性对照，便于区分假阴性样品；
4.一管式闭管操作，降低了交叉污染；
备注：1.本公司提供各类指标的PRC试剂盒，包括染料法和探针法，另提供相关试剂。
2.需详细说明书请联系客服。
联系方式如下：
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联系电话：13997448220(同微信) QQ：1750215841
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文献和实验等。 基因表达差异分析。例如比较经过不同处理样本之间特定基因的表达差异 (如药物处理、物理处理、化学处理等)，特定基因在不同时相的表达差异以及 cDNA 或差显结果的确证。 基因分型。例如 SNP 检测，甲基化检测等。 实时荧光定量 PCR 技术在医疗方面的应用： 病原体检测： 目前，采用荧光定量 PCR 检测技术可以对淋球菌、沙眼衣原体、解脲支原体、人类乳头瘤病毒、单纯疱疹病毒、肝炎病毒、结核杆菌、细小病毒 B19、EB 病毒和人巨细胞病毒等病原体进行定量测定。与传统的检测方法相比具有
研究1、 产前诊断：人们对遗传性物质改变引起的遗传性疾病还无法治疗，到目前为止，还只能只能通过产前监测，减少病婴出生，以防止各类遗传性疾病的发生，如为减少X连锁遗传病患儿的出生，从孕妇的外周血中分离胎儿DNA，用实时荧光定量PCR检测其Y性别决定区基因是一种无创伤性的方法，易为孕妇所接受。2、 病原体检测：采用荧光定量PCR检测技术可以对淋球菌、沙眼衣原体、解脲支原体、人类乳头瘤病毒、单纯疱疹病毒、人类免疫缺陷病毒、肝炎病毒、流感病毒、结核分枝杆菌、EB病毒和巨细胞病毒等病原体进行定量测定。与传统的检测
或者 Ct 值偏大的样本孔，到底是真的没有要检测的对象，还是扩增有问题，亦或是提取中的问题？为了发现这种假阴性的发生，合理的阳性对照可以监控实验的不同步骤： 扩增对照 Amplification Control 可使用含有扩增片段的质粒、假病毒或者基因组 DNA/cDNA 作为扩增阳性对照，监控荧光定量 PCR 的体系是否正常，包括酶、引物、探针等。如果检测中包含多个目标片段，可以将这些目标片段都克隆到同一个质粒中，方便制备和使用。当扩增对照没有扩增，或者 Ct 值大于预期，则说明定量 PCR
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