IPTG(异丙基-D-硫代半乳糖苷)
产品储存:2-8℃
产品规格:
产品参数:
CAS:367-93-1
英文名称:IPTG Dioxane Free; IPTG(Isopropyl β-D- Thiogalactopyranoside )
中文别名:异丙基-β-D-硫代半乳糖苷;1-甲基乙基-β-D-1-硫代半乳糖吡喃糖苷
分子量:238.31
分子式:C9H18O5S
纯度:≥99.6%
外观(性状):白色结晶或粉末
溶解性:50mg/ml,溶于水和乙醇
产品说明:
IPTG 是β–半乳糖苷酶的活性诱导物质。蓝白斑筛选中,IPTG 作为安慰性诱导物诱导细菌内的蛋白表达,X-gal 作为生色底物。其原理为 IPTG 可诱导载体 Lac 操纵子 DNA 区段合成β-半乳糖苷酶氨基端片段,该片段可与宿主细胞编码的缺陷型β-半乳糖苷酶实现基因内互补(α互补),实现α互补的细菌铺在含有 X-gal生色底物的培养基上,可形成蓝色菌落;而外源 DNA 插入质粒的多克隆位点后,可破坏α互补作用,培养基上将长出白色菌落。IPTG 也是常用的基因工程中重组蛋白表达的诱导剂。
0.1 M IPTG 储存液配制:
1)称取 0.238 g IPTG;加入去离子水至 10 mL,完全溶解;
2)用 5-10 mL 去离子水润湿 0.22 μm 针头过滤,IPTG 溶液过膜除菌;
3)分装成 1 mL,-20℃冻存,有效期可达 1 年。
蓝白斑筛选:
(1)制作平板:将 100 mL 含琼脂培养基高压灭菌后的冷却至 55℃以下时,加入 500 μL 的 X-gal 溶液(20mg/mL)、250 μL 的 IPTG 溶液(50 mg/mL)和 100 μL 的抗生素(氨苄青霉素,100 mg/mL),制作成含X-Gal、IPTG 和抗生素(Amp)平板培养基。
实际操作中 X-gal 和 IPTG 可以直接涂抹在平板培养基表面,90 mm 的平板,X-gal(20 mg/mL)涂 40μL,IPTG(50 mg/mL)涂 16 μL。150 mm 的平板使用量加倍,待涂布的液体干后就可以使用。
(2)细菌铺板:37℃过夜培养,可根据长出菌体的蓝白色,而方便地挑选出基因重组体(白色菌落为具有 DNA 插入片段的基因重组体)。
注意事项:
1.含有 IPTG 的培养基 4℃避光保存,须在 1 周内使用。
2. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。
3. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
4. 产品信息仅供参考
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!