胶原酶II 9001-12-1

产品储存：-20℃、避光

产品规格：

产品说明：

胶原酶（Collagenase）是一种蛋白酶，一种肽链内切酶，能够特异性的识别 Pro-X-Gly-Pro 序列（该序列高频率出现在胶原中，很少发现于其它蛋白中）并切割该序列中性氨基酸（X）和甘氨酸（Gly）之间的肽键。许多蛋白酶都能水解单链且变性的胶原多肽，但胶原酶是唯一一种可以降解具有三股超螺旋结构的天然胶原纤维的蛋白酶，这种胶原纤维广泛存在于结缔组织内。

胶原酶Ⅰ用于上皮、肺，脂肪和肾上腺组织细胞的分离。胶原酶Ⅱ用于分离脂肪细胞，也可以用于分离各种组织、肿瘤，尤其是上皮组织。两者外观为深棕色粉末。分子量 68,000 到 125,000，最适 pH 为 6.3-8.8。

两者均为溶组织梭菌分泌的混合酶，主要为胶原酶、中性蛋白酶和梭菌蛋白酶。其中梭菌蛋白酶是被氧化的、最不活泼的酶，组织的分离必须依靠胶原酶和中性蛋白酶两者共同作用。

胶原酶Ⅳ能消化多种组织。胶原酶的使用浓度一般为 0.1-5 mg/mL，消化过程中可以搅拌以促进酶的消化。胶原酶Ⅴ可用于胰腺小岛组织的分离，将结缔组织分离成单个细胞。消化软骨组织的浓度一般为 1-2mg/mL，消化肝脏组织大约 1 mg/mL。但是具体的消化浓度因种属特异性而异。两者均含有至少 7 种蛋白酶成分，分子量从 68-130KD 不等。

很多文献指出胶原酶可以消化多种组织，胶原酶的使用浓度一般为 0.1-5 mg/mL，消化过程中可以搅拌以促进酶的消化作用。胶原酶在消化的过程中可以引起细胞的少量死亡，一般消化时间为 15 min 至数小时。如果浓度发生变化那么消化时间可能更长。消化过程中的缓冲液为含钙离子和 BSA 的 Krebs RingerBuffer。在消化的过程中如果细胞大量死亡则需要降低酶量，同时可以加入 0.5%BSA 或 5-10%血清来稳定细胞的状态和消化效果。

胶原酶保存液：（配制方法仅供参考，请根据具体实验要求结合文献进行使用）

用 TESCA buffer（50 mM TES，0.36 mM 氯化钙，pH 7.4，37°C）配制成 1-2 mg/mL。也可以用含钙镁的 PBS、含钙镁的 Hanks 或不含血清的培养基配制。过滤除菌，分装成小份量，于-20℃避光冻存，避免反复冻融。

注意事项：

1. 因为Ⅰ型胶原酶分子颗粒比胰酶大，不容易过滤，因此可以用蔡式滤器过滤除菌。

2. 钙镁离子的加入对于胶原酶的酶解作用尤为重要。

3. 配完后分装，避免反复冻融。

4. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。

5. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

6. 产品信息仅供参考
本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途！