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Hoechst 33342染色
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50
Hoechst 33342 stain Solution(1mg/ml)
期 1 年
上海博尔森生物科技有限公司
-20℃
1mL /1mL×5
保存:-20℃保存,保质期 1 年。
产品内容:
Hoechst 33342 是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低。常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。也用于普通的细胞核染色,或常规的 DNA 染色。Hoechst-DNA的激发和发射波长分别 350nm 和 460nm。
本 Hoechst 33342 染色液可直接用于固定细胞或组织的细胞核染色,也可直接用于活细胞或组织的细胞核染色。
使用方法:
1. 对于固定的细胞或组织
a. 对于细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行 Hoechst 33342 染色。如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的 Hoechst 33342 染色。
b. 对于贴壁细胞或组织切片,加入少量用免疫染色洗涤液、PBS 或生理盐水稀释至 1×的本产品,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞,至少加入待染色样品体积 3 倍的 1×染色液,混匀。室温放置 3-5 分钟。
c. 吸除 Hoechst 33342 染色液,用 TBST、PBS 或生理盐水洗涤 2-3 次,每次 3-5 分钟。
d. 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时,会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。
2. 对于活细胞或组织:
a. 对于培养器皿内的活细胞或组织,在培养液中均匀滴加适量的 Hoechst 33342 活细胞染色液(100×)至终浓度为 1×,轻柔混匀。例如对于十二孔板中培养的细胞,每孔有 1ml 的培养液,每孔需要加入 10μl Hoechst33342 活细胞染色液(100X)。培养液中的血清、酚红等都不会对染色产生干扰。
b. 在适宜于细胞培养的温度培养 20-30 分钟。弃染色液,用 PBS 或培养液洗涤 2-3 次即可进行荧光检测。
注意事项:
1. 荧光染料易淬灭,建议染色后尽量当天完成检测。活细胞或组织染色后宜立即观察。
2. 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液
3. Hoechst 33342 对人体有害,请注意适当防护。请穿实验服并戴一次性手套操作。本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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