- ￥228
- 博尔森/BIOESN
- BES22210KB
- 中国
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
50
- 英文名：
5%Phosphotungstic acid negative stain solution
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海博尔森生物科技有限公司
- 保存条件：
常温
- 规格：
100mL
保存：常温保存，避光，保质期 1 年。
产品内容：
产品说明：
负染色又称阴性染色，是由 Hall 发现的相对于普通染色(即正染色)而言的染色技术。其原理在于利用重金属盐包绕低电子密度的样品，增强样本四周的电子密度，造成细微结构之间的＂质量－厚度”差异，增强散射吸收反差，使样品在黑暗的背景上呈现明亮的结构。负染色液有磷钨酸、钼酸铵、印度墨汁等，其中最常用的是 1～3%磷钨酸。 磷钨酸负染色液适用于显示大分子、细菌、病毒、原生动物、噬菌体、细胞器、核酸大分子、蛋白质晶体及其他大分子材料等，尤其适用于较难染色的样本。染色后的样品图像呈现透明的亮光，而背景图像呈黑色。
对于大多数样品的负染，2～3%磷钨酸已经足够，5%磷钨酸可用于较难染色的样本。
操作步骤：
（一）滴染法
1、样品低速离心或采用其他方法浓缩样品，制成悬浮液并且使其达到一定浓度和纯度。
2、将样品悬浮液直接滴于带有支持膜的载网上，静置 3～5min。
3、用滤纸条从液滴边缘吸去多余液体，稍干燥。
4、滴加负染色液。
5、吸去多余染色液，自然干燥，进行显微镜观察。
（二）漂浮法
1、样品低速离心或采用其他方法浓缩样品，制成悬浮液并且使其达到一定浓度和纯度。
2、将带有支持膜的载网置于样品液滴上漂浮以沾取样品。
3、载网置于负染色液上漂浮 1～2min。
4、吸去多余染色液，自然干燥，进行显微镜观察。
注意事项：
1、 目的样本尽量新鲜。
2、 样品应为均匀的悬浮液，其纯度和浓度应适宜，否则无法与染色剂之间产生特异和清晰的结合反应。
3、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
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文献和实验(如重金属盐等)“包埋”低电子密度的样品，结果在图像中背景是黑暗的，而样品像“透明”的光亮。两着之间的反差正好相反，故称为负染色。对颗粒状的生物材料的研究而言，负染色技术较之超薄切片方法具有分辨率高(可达15?魡) 、简单快速等优点。因此在生物学研究中得到越来越广泛的应用,可以显示生物大分子、细菌、病毒、分离的细胞器以及蛋白质晶体等样品的形状、结构、大小以及表面结构的特征,尤其在病毒学中，负染色技术成为不可取代的实验技术。 （一）负染色液的制备 用作负染色的物质应具有：①较强的电子散射能力
Mallory氏磷钨酸苏木素染法(简称P、T、A) 操作方法： （1）固定于Zenker氏固定液的组织，如系10%甲醛固定的组织切片，可再经Zenker氏液处理，如不处理亦可染色，但其结果欠佳 （2）石蜡切片如系Zenker氏液固定的组织，或曾经Zenker氏液处理过的切片，在染色之前需经0.5%碘酒精脱汞，水洗后再经0.5%硫代硫酸钠的脱碘。 （3）经 蒸馏 水洗后，将切片置于0.25%高锰酸钾溶液中5分钟。 （4）经 蒸馏 水洗
片段。在抗体与标本作用后，再加入铁蛋白与抗体结合，从而显示组织内抗原的所在部位。后者则用磷酸钨负染后，直接电镜观察。 二、材料及试剂 1．待检病毒材料 如：粪便，气管分泌物、脑脊髓液、组织培养液等。 2．高速离心机 3．已知抗体 4．磷钨酸 5．琼脂糖 6．其它 三、操作方法 1．经典法 （1）将被检病毒材料0.9ml，加1︰5～1︰10稀释的特异性免疫血清0.1ml充分混合。 （2）置37℃作用1h或37℃1h后再置4℃过夜。 （3）以17 000r/min～23
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