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- 博尔森/BIOESN
- BES22085KB
- 中国
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 技术资料
- 库存：
50
- 英文名：
AO Fluorescence Stain Kit
- 保质期：
12 个月
- 供应商：
上海博尔森生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8 ℃
- 规格：
100T
AO荧光染色试剂盒
储存条件：2-8 ℃避光保存，12 个月有效产品组成：
产品介绍：
吖啶橙(Acridine Orange, AO)属于三环杂芳香燃料，可以标记 DNA、RNA，属于异染性荧光染料。该 染料具有膜通透性，能透过细胞膜，使核 DNA 和 RNA 染色。因此 AO 常用于细胞内 DNA 和 RNA 进行检测。 AO 与核酸结合方式主要有：1、插入性结合，AO 嵌入核酸双链的碱基对之间，这种结合方式主要为 AO 与 DNA 的结合，其荧光发射峰为 530nm，激发后呈绿色荧光；2、静电吸引，带正电荷的 AO 与单链核酸的磷 酸根(带负电荷)产生静电间的吸引结合，这种结合方式主要为 AO 与 RNA 的结合，其荧光发射峰为 640nm， 激发后呈红色荧光，少量结合会呈桔黄色或桔红色荧光。因此，吖啶橙嵌合到双链 DNA 分子中显绿色，与 DNA 单链或 RNA 结合时发桔黄色或橙红色荧光。
吖啶橙染色试剂盒(Acridine Orange Detection Kit)主要由 AO Stain、AO Stain Buffer 组成，常 用于细胞凋亡的检测。染色后在荧光显微镜下观察，吖啶橙可透过正常细胞膜，使细胞核呈绿色或黄绿色 均匀荧光；而在凋亡细胞中，因染色质固缩或断裂为大小不等的片断，形成凋亡小体。吖啶橙使其染上致 密浓染的黄绿色荧光或黄绿色碎片颗粒；而坏死细胞黄荧光减弱甚至消失。吖啶橙染色常与 EB 染色合用 双染，EB 只染死细胞，使之产生桔黄色荧光，由此可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。
自备材料：
荧光显微镜，低速离心机，PBS，细胞计数板，载玻片、盖玻片。
使用说明(仅供参考)：
(一) AO 单独染色
1. 收集细胞(采用流式细胞仪检测时，应先固定细胞)，用 AO Stain Buffer(1×)清洗细胞 1 次，加入适量的 AO Stain Buffer(1×)重悬细胞，计数并调节细胞浓度至 106/mL。
2. 取适量的细胞悬液和 AO Stain，按照细胞悬液：AO Stain=19：1 的比例混合，轻轻混匀。如果采用荧光显微镜下观察，一般取 95μL 细胞悬液和 5μL AO Stain 混合即可。
3. 室温避光染色 15 min，滴加于载玻片上并加盖玻片或上流式细胞仪分析。
4. 荧光显微镜下观察(激发滤光片波长 488nm，阻断滤光片波长 515nm)，计数并拍照。
染色结果：
正常细胞：细胞被均匀染成黄绿色荧光
凋亡细胞：染色质浓缩，细胞核碎裂成点状，被染成大小不一、致密浓染的绿色颗粒
(二) 与 EB 双染色：
1. 收集细胞，用 AO Stain Buffer(1×)清洗细胞 1 次，加入适量的 AO Stain Buffer(1×)重悬细胞，计数并调节细胞浓度至 106/mL。
2. 取适量的细胞悬液和 AO Stain，按照细胞悬液：AO Stain=19：1 的比例混合，并加入适量 EB 染色液，轻轻混匀。如果采用荧光显微镜下观察，一般取 95μL 细胞悬液和 5μL AO Stain 混合即可。
3. 室温避光染色 15min，滴加于载玻片上并加盖玻片。
4. 荧光显微镜滤光片 515nm 观察，计数并拍照。
染色结果：
正常细胞：均匀染成绿色荧光
坏死细胞：细胞桔黄色荧光
凋亡细胞：染色质浓缩，细胞核碎裂，被染成大小不一、致密浓染的黄绿色颗粒或见胞质芽状突起。
计算细胞凋亡率和死亡率:
细胞死亡率=凋亡细胞/细胞总数×100%
细胞坏死率=坏死细胞/细胞总数×100%
注意事项：
1. 吖啶橙染色常不 EB 染色合用，可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。
2. 如有低温离心机进行离心效果更佳，同时应注意减少试剂暴露于强光下的时间。
3. 该培养基仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其它用途。
4. 操作过程中应注意减少试剂暴露于强光下的时间。
5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
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AO荧光染色试剂盒
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