- ￥1114 - 4624
- 博尔森/BIOESN
- BES22075KB
- 中国
- 2025年07月12日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
50
- 英文名：
DEAE Sepharose CL-6B
- 供应商：
上海博尔森生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
100mL /500mL
| 规格： | 100mL | 产品价格： | ￥1114.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 500mL | 产品价格： | ￥4624.0 |
1. 外观
本品呈白色，球状、无嗅、无味、无肉眼可见杂质。
2. 理化指标
*检测条件： 层析柱 10mm×300mm *柱床高 15cm,25℃, 流动相为 0.1mol/LNaCl
3． 包装
产品以聚胺酯瓶密封包装，外贴标签，注明“品名、体积、颗粒大小”等内容。
4．运输
运输中应避免日晒、雨淋、重压，严禁与有毒、有害物品混运。
5． 贮存
产品应密封贮存在 4℃~25℃（保存溶液为 20% 乙醇），通风、干燥、清洁的地方。不能冷冻。用过的柱子贮存在 4℃（20% 乙醇）。
6.注意事项
本产品避免与氧化剂接触；避免在 pH 值 < 4 时长时间暴露(一周,20℃)。
7.保质期：5 年。
8.应用
本产品具有高化学稳定性、高流速、高载量、好的机械性能、可在位清洗、多次重复使用等特点，非特异性吸附低，回收率高，适用于工业规模生产，适用于在 pH 工作范围内可形成负离子的生物大分子的分离纯化，广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的离子交换制备。
下面简要介绍介质的使用过程。
8.1 装柱
⑴让所有的材料和试剂达到室温。配制初始缓冲液（平衡液）和洗脱缓冲液。
⑵根据柱子大小取所需量的凝胶，清洗掉 20%乙醇，抽干，用初始缓冲液（按凝胶：缓冲液=3：1 的比
例）配成匀浆。匀浆作脱气处理。
⑶将柱内及柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位（液面略高于滤膜），务必使底端无气泡。
⑷用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内，注意勿使产生气泡。打开柱子出液口，使凝胶在柱
内自由沉降，连结好柱子顶端柱头。
⑸打开蠕动泵，让缓冲液用使用时流速的 1.33 倍的流速流过，使柱床稳定。用 2~3 倍柱体积的缓冲液平衡柱子。
8.2 平衡
让平衡缓冲液以一定流速流过柱子，到流出液电导和 pH 不变。平衡液是低浓度的缓冲溶液，如 Tris 、
PBS 等。
8.3 上样
⑴样品用平衡液配制，浑浊的样品要离心和过滤后上样。盐浓度太大的样品处理后再配。
⑵一般情况是让目标产品结合在柱子上，用平衡液洗去杂质，再选择一种洗脱液洗下目标产品。
⑶介质对样品组分吸附的程度取决于样品的带电性质、流动相的离子强度和 pH 值。盐浓度小，介质对样品组分吸附较牢。用 DEAE 介质时，推荐的 pH 值是大于目标产品等电点 1 个单位。
8.4 洗脱
DEAE 介质可用增大盐浓度或减小 pH 值进行洗脱，常用增大盐浓度的办法洗脱。
8.5 再生
一般用高盐浓度的缓冲液（含 1~2mol/L NaCl）洗或减小 pH 洗 10 倍以上柱体积，接着用结合蛋白的平衡液洗到平衡，可再次使用。
若有失活蛋白质或脂类物质在再生时洗不掉，可用在位清洗（CIP）除去。
8.6 在位清洗
⑴ 对于以离子键结合上去的蛋白，可以用 2M Nacl 去除。
⑵ 对沉淀蛋白、对以疏水性结合的蛋白或脂类，可用 1M NaOH 去除。
⑶ 对强疏水性结合的蛋白、脂类等，用 4~10 倍柱体积的 70%乙醇或 30%异丙醇清洗，但要注意有机溶剂的浓度以梯度的方式逐渐增加，否则容易产生气泡。
清洗完毕后，用至少 3 倍缓冲液平衡柱子。
8.7 注意
在装柱、使用和保存柱子的时候，要避免柱子流干，气泡进入。
8.8 去热源
用 0.5M 清洗柱子 5~6 小时或用 0.1M 的24 小时。或用以下方法步骤去除：
⑴ 2 倍柱体积的 70%乙醇
⑵ 2 倍柱体积 50mM Tris-Hcl pH7.5
⑶ 1 倍柱体积 4M 尿素
⑷ 3 倍柱体积的 Tris 缓冲液+0.1M Nacl
以上缓冲液都在无热源的双蒸水中配制
8.9 消毒
用 0.5~1M NaOH 室温下洗 8~10 倍柱体积，初始缓冲液平衡柱子。
8.10 灭菌
置介质于高压灭菌锅中 120℃下 30 分钟。
本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
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文献和实验-150000Sephadex G-100 葡聚糖凝胶 G-100 分离范围 4000-150000Sephadex G-150 葡聚糖凝胶 G-150 分离范围 5000-300000DEAE Sepharose CI-6B 琼脂糖凝胶CI-6B 分离范围：5000-300,000Sephadex G-150 葡聚糖凝胶 G-150 分离范围 5000-300000Sephadex G-200 葡聚糖凝胶 G-200 分离范围 5000-600000Sephadex G
大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶E292对于氨基酰化活性的作用
4) 将湿菌体悬浮于20毫升0 o C预冷的破菌缓冲液(50 mM磷酸钾缓冲液，pH6.8，含10 mM巯基乙醇，2 mM PMSF，10%甘油)中，冰浴超声波破菌。 5) 将破菌液于4o C，12，000g离心30分钟后继续经4 o C， 150，000g超离心1小时。 6) 取上清液经过DEAE-SepharoseTM Fast Flow和HA-Ultrogel两步柱层析纯化。在DEAE-Sephorose CL-6B fast flow纯化中使用的线性洗脱梯度
试剂盒（玻璃乳法）:（1）在 UV 灯下，从琼脂糖凝胶上切下含 DNA 片段的凝胶，放入一离心管中；（2）加入 3 倍体积的 6 mol/L NaI 溶液，45～55 ℃ 水浴 5～10 min 使胶完全融化；（3）加入 10? 滋 l 玻璃乳悬液，轻弹管底混匀，然后 45～55 ℃ 水浴 5～10 min，期间每 2～3 min 混匀一次；（4）5000 rpm 离心 30~60 秒，弃上清；（5) 加 400? 滋 l 漂洗液（20 mM Tris.Cl，pH7.4/1 mM EDTA/100 mM
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