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- 博尔森/BIOESN
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- 中国
- 2025年07月10日
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≤0.2M borate Buffer (Customized）
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上海博尔森生物科技有限公司
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RT
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500mL
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文献和实验RNA 的提取1. 异硫氰酸胍法【实验原理】异硫氰酸胍法提取细胞总 RNA 是目前常用的提取方法，其基本原理是：异硫氰酸胍 (GuSCN) 是一种强的蛋白质变性剂，不仅能使细胞裂解，同时还能有效地抑制细胞内源性 RNA 酶的活性，通过有机溶剂的分步抽提，最终可获得纯度较高的细胞总 RNA。【实验对象】新鲜哺乳动物组织或细胞【实验试剂与器材】（1）GuSCN 缓冲液：4 M 异硫氰酸胍 (GuSCN) ，25 mmol/L 柠檬酸 (pH7.0)，0.5% 十二烷基肌氨酸钠（SLS）。配制方法：先称取
PH9.5碳酸缓冲液0.25ml，继续搅拌3小时。（5）加0.2M赖氨酸0.25ml，混匀后，置室温2小时。（6）在搅拌下逐滴加入等体积饱和硫酸铵，置4℃ 1小时。（7）3000rpm离心半小时，弃上清。沉淀物用半饱和硫酸铵洗二次，最后沉淀物溶于少量0.15M PH7.4的PBS中。（8）将上述溶液装入透析袋中，对0.15M PH7.4的PBS缓冲盐水透析，去除铵离子后(用萘氏试剂检测)，10,000rpm离心30分钟去除沉淀，上清液即为酶结合物，分装后，冰冻保存。3. 结果判定（1）定性及效价
钠 3ml 与 1M 碳酸氢钠 7ml 混合。 (4) 0.2M 赖氨酸溶液：称赖氨酸 29.2mg 溶于 0.01M PH9.5 碳酸缓冲液 1ml 中。 (5) 0.15M PH7.4 PBS 及生理盐水。 (6) PH7.8 饱和硫酸铵溶液及半饱和硫酸铵溶液。 (7) 萘氏试剂及聚乙二醇 (PEG ， MW2000) 。 (8) 纯化的特异性抗体或抗 Ig 抗体。 (9) HRP(RZ
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